Question

根据所学生物学知识回答下列问题：
（1）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的    中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的      上。
（2）目前临床上使用的红细胞生成素（一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血）主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的      细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成，在融合过程中至少需要进行     次筛选。
（3）左下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。右下图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和PstⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是         

A．1 为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ

B．1 为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ

C．1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ

D．1 为EcoRⅠ，2为PstⅠ，3为PstⅠ，4为BamHⅠ

（4）运用基因工程技术已经创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需从cDNA文库中获取，并与羊的乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；再通过_________方法，将表达载体导入羊的______________，获得重组细胞。将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过同期发情处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加__________（1分）。

Answer 1

（15分）
（1）T—DNA    染色体DNA    （2）杂交瘤      2
（3）C  （4）    显微注射   受精卵     动物血清（1分）

解析试题分析：
（1）用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，首先将目的基因导入农杆菌 Ti质粒的T—DNA中，再利用农杆菌侵染植物细胞，通过 DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体的DNA上。
（2）制备单克隆抗体是让淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。在融合过程中至少需要进行2次筛选，第一次筛选出骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，第二次筛选是从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞。
（3）由题知上述三种酶识别的序列和切割的位点各不相同，因此，要防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，该DNA分子在图示的4个位置被切开后，在位置2和3处应不能产生相同的黏性末端，由题可知：在位置2和3处不能为同一种限制性核酸内切酶，故答案选C。
（4）将目的基因导入动物细胞常用显微注射方法，用受精卵做受体细胞。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加动物血清。
考点：本题考查基因工程及胚胎工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。