Question

【题目】红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：

（1）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是_____________ 。洗涤红细胞时要用______（填溶液）反复洗涤、离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入_________。

（2）得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去_______。

（3）然后通过_____（填方法）将样品进一步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是______（填方法）。

Answer 1

【答案】防止血液凝固 生理盐水蒸馏水和甲苯去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

【解析】

本题是对血红蛋白的提取和分离的实验的考查，回忆血红蛋白的提取和分离的实验的实验原理和操作步骤，然后结合题干信息进行解答。血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固。样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步。洗涤红细胞时要用生理盐水反复洗涤、离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入蒸馏水和甲苯。

（2）透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去样品中分子量较小的杂质，透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。

（3）样品的纯化是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。