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7.PCR技术(多聚酶链式反应)是分子生物学实验的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在PCR仪中进行DNA的人工复制(如图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体.

(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开氢键,称为解旋,细胞中是在解旋酶的作用下使此键断裂的.
(2)当温度降低时,引物与模板3′端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程中原料是四种脱氧核苷酸,遵循的原则是碱基互补配对原则.
(3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、引物、酶以外,至少还需要三个条件,即液体环境、适宜的温度和酸碱度.
(4)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95℃→55℃→72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%.
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变.假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占50%.

分析 分析题图:图示为采用PCR技术(聚合酶链式反应)扩增样品DNA的过程,首先是高温变性过程,该过程中氢键断裂,DNA分子解旋为单链;其次是低温复性的过程,该过程中一对因为与模板结合形成局部双链结构;最后是中温延伸过程.

解答 解:(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开氢键,称为解旋,在细胞中是在解旋酶的作用下使此键断裂.
(2)当温度降低时,引物与模板3’端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸作为原料,遵循的原则是碱基互补配对原则.
(3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件.即:液体环境、适宜的温度和酸碱度.
(4)DNA分子的复制方式为半保留复制,如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,经过3次复制,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占$\frac{2}{{2}^{3}}=\frac{1}{4}$,即25%.
(5)碱基对的错配属于基因突变;假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,由于DNA分子复制方式为半保留复制,则以正常链为模板复制所得子代都正常,以异常链为模板扩增所得子代都异常,即与原DNA相应片段相同的占50%.
故答案为:
(1)氢 解旋 解旋酶
(2)3′四种脱氧核苷酸 碱基互补配对原则
(3)温度 酸碱度 
(4)25% 
(5)基因突变 50%

点评 本题结合题图,考查基因工程、PCR技术等知识,要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用;识记PCR技术的原理及过程,能与体内DNA复制过程进行比较,属于考纲识记和理解层次的考查.

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