Question

12．酵母菌是一种单细胞的兼性厌氧真菌，被广泛应用于生产、生活实际中．下面是有关酵母菌的一些问题，请分析回答：
（1）为了进行果酒的发酵生产，通常先分离纯化酵母菌，然后扩大培养、固定化酵母细胞，最后才接种、发酵．
①在分离纯化酵母菌时，需要进行无菌操作，其中对培养皿通常采用干热灭菌灭菌．
②在扩大培养时，使用液体（“固体或液体”）培养基培养过程中，并要不断进行振动或者搅拌，目的是振动或搅拌的目的是增加溶解氧含量，同时有利于酵母菌与营养物质的接触．
③固定化酵母细胞常采用包埋法，若要使这些酵母反复利用，实验过程中一定要注意无菌条件（或者避免其他微生物的污染）．
④用果汁发酵后检测是否有酒精产生，可以在酸性条件下用重铬酸钾检验，如果出现灰绿色，说明产生了酒精．
（2）在家庭酿制米酒的过程中，需要在混匀酒药的米饭中间挖一个洞，目的是增加氧气含量，以利于酵母菌繁殖．
（3）通过筛选获得产胡萝卜素的酵母菌R生产胡萝卜素，其大致过程是：培养酵母菌R，进行菌体裂解、离心、沉淀，用萃取法提取、过滤、浓缩，最后用纸层析法鉴定胡萝卜素．在鉴定过程中，需要用胡萝卜素标准品作为对照．

Answer 1

分析 1、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
3、植物芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法和萃取等．
（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性．把含有芳香油的花、叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，这种提取方法叫蒸馏法．
根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏．
（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机溶剂中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油．
（3）压榨法：在橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法．

解答 解：（1）对培养皿的灭菌通常采用干热灭菌法，对培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌法，对接种工具灭菌有灼烧法等；扩大培养时，选用液体培养基，通过振动或搅拌能使酵母菌在氧气充足的情况下，充分利用营养物质繁殖后代，增加酵母菌数量．固定化酵母细胞通常采用包埋法，要反复利用，必须注意要在无菌条件下操作，以免杂菌污染．检测酒精用酸性重铬酸钾．
（2）米酒制作中，在米饭中间挖一个洞是为了增加氧气含量，使酵母菌在开始阶段大量繁殖，有利于后期进行厌氧发酵，产生酒精．
（3）胡萝卜素的提取方法通常采用萃取法，鉴定方法采用纸层析法，并用胡萝卜素标准品进行对照．
故答案为：
（1）①干热灭菌    ②液体    振动或搅拌的目的是增加溶解氧含量，同时有利于酵母菌与营养物质的接触      
③包埋    无菌条件（或者避免其他微生物的污染）     ④重铬酸钾      
（2）氧气     
（3）萃取     纸层析    对照

点评 本题考查果酒和果醋的制作、微生物分离和培养、从生物材料中提取某些特定成分，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的方法等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．