Question

14．根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：
（1）绿色硬纸板（甲DNA分子）的碱基序列为：
…ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC…
…TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG…
红色硬纸板（乙DNA分子）的碱基序列为：
…TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC…
…AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG…
其中，乙 DNA分子含有“目的基因”，甲 DNA分子是“质粒”．
（2）用剪刀代表进行切割．酶切位点在a处 （a处还是b处），此化学键称为磷酸二酯键．请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点．
（3）你模拟插入的DNA片断能称得上一个基因吗？不能．EcoRI属于限制性核酸内切酶 酶．
（4）从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的受体群 的群体．按照其中所含基因的量又可分为基因组 文库和部分基因 文库．

Answer 1

分析 据图分析，a表示磷脂二酯键，b表示氢键．限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．

解答 解：（1）EcoRI酶的识别序列是-GAATTC-，甲中含有一个识别序列，乙中含有两个识别序列，所以甲表示质粒，乙中含有目的基因．
（2）限制酶的切割位点是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键．EcoRI限制酶能识别-GAATTC-序列，并在G与A之间切割核苷酸序列，切割方式如下：
绿色硬纸板（DNA分子甲）的碱基序列为：
…ATAGCATGCTATCCATG||AATTCGGCATAC…
…TATCGTACGATAGGTACTTAA||GCCGTATG…
红色硬纸板（DNA分子乙）的碱基序列为：
…TCCTAG||AATTCTCGGTATG||AATTCCATAC…
…AGGATCTTAA||GAGCCATACTTAA||GGTATG…
（3）基因是具有遗传效应的DNA片段，该片断不能称为一个基因．EcoRI属于限制酶．
（4）基因文库是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的受体菌的群体，包括基因组文库和部分基因文库．
故答案为：
（1）乙，甲   
（2）a处，磷酸二酯键
绿色硬纸板（DNA分子甲）的碱基序列为：
…ATAGCATGCTATCCATG||AATTCGGCATAC…
…TATCGTACGATAGGTACTTAA||GCCGTATG…
红色硬纸纸（DNA分子乙）的碱基序列为：
…TCCTAG||AATTCTCGGTATG||AATTCCATAC…
…AGGATCTTAA||GAGCCATACTTAA||GGTATG…
（3）不能，限制性核酸内切酶     
（4）受体菌    基因组    部分基因

点评 本题以DNA分子的结构为载体，考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图和判断能力，属于中档题．