Question

34.   【生物一生物技术与实践】（8分）

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取lg，置于经   过______法灭菌处理的______ (填“固体”或“液体”）培养基中，28T振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行______处理。之后，将菌液涂布接种于以______为唯一碳源的固体培养基上，30⁰C条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈____________状态放置。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是______，则说明此种菌能够______。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用______法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

Answer 1

【答案】34.(1)高压蒸汽灭菌   液体     (2)系列稀释(或“梯度稀释”)     淀粉     倒置   (3)出现透明圈     分泌淀粉酶使淀粉发生消解      (平板)划线

解析:本题主要考查微生物培养有关知识。

（1）灭菌方法一般用高压蒸汽灭菌，由于接下来要用划线法接种，所以在些要用液体培养基

（2）减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。要选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，培养基就必须含有且只有淀粉的培养基，倒置可以减少培养基受污染，为排除其它因素影响，需要设置未接种的空白的培养基对照组。

（3）淀粉被水解，培养基会出现透明的现象。用划线法来培养,可进一步纯化菌种。