Question

17．已知限制性核酸内切酶BglⅡ和BamHⅠ的识别序列和切割位点分别为A↓GATCT，G↓GATCC．下列有关叙述，不正确的是（　　）

• A． 这两种酶的识别序列都为6个脱氧核苷酸对
• B． 用这两种酶切割质粒和含目的基因的DNA分子所产生的黏性末端可形成重组DNA分子
• C． 用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，仍可以被这两种酶切开
• D． 在基因工程中，若用酶BglⅡ切割某质粒，则该质粒上有且只有一个该酶的切点

Answer 1

分析 1、“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的．
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．
2、BglⅡ识别序列和切割位点为 $\frac{\underline{\;A↓GATCT\;}}{TCTAG↑A}$，切割后的粘性末端为；
BamHⅠ的识别序列和切割位点为 $\frac{\underline{\;G↓GATCC\;}}{CCTAG↑G}$；切割后的粘性末端为．

解答 解：A、限制性核酸内切酶BglⅡ和BamHⅠ的识别序列和切割位点分别为$\frac{\underline{\;A↓GATCT\;}}{TCTAG↑A}$和$\frac{\underline{\;G↓GATCC\;}}{CCTAG↑G}$，所以这两种酶的识别序列都为6个脱氧核苷酸对，A正确；
B、用这两种酶切割质粒和含目的基因的DNA分子所产生的黏性末端都是-GATC-，所以在DNA连接酶的作用下，可形成重组DNA分子$\frac{\underline{\;GATC\;}}{CTAG}$，B正确；
C、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，重组DNA分子$\frac{\underline{\;AGATCT\;}}{CCTAGG}$，6个脱氧核苷酸对序列不再是回文结构，既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开，但是$\frac{\underline{\;GATC\;}}{CTAG}$是回文结构，可以被其他酶识别、切割，C错误；
D、在基因工程中，若用酶BglⅡ切割某质粒，则该质粒上有且只有一个该酶的切点，否则会造成质粒部分片段缺失，D正确．
故选：C．

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握限制酶的作用特点，根据题干信息判断两种酶切割后的黏性末端是否能发生重组以及连接的方式，同时要求考生能够写出切割后形成的黏性末端以及连接后的碱基序列，再结合题干信息准确判断各项．