Question

要获得遗传特性单一的枯草杆菌菌种，一般必须对原有的菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种．请回答以下问题：
（1）获得纯净枯草杆菌的关键是

 

，为此，必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌．在接种或倒平板操作时，除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外，还必须

 

，以防止空气中的杂菌污染．
（2）如图是纯化枯草杆菌的方法，该纯化分离方法的名称是

 

．
（3）枯草杆菌可以产生α-淀粉酶，以下是利用诱变育种方法培育获得产生较多淀粉酶菌株的主要实验步骤．（原理：菌株生长过程中可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈．）
第一步：将枯草杆菌接种到液体培养基上进行扩大培养．
第二步：将枯草杆菌分成A、B两组，

 

．
第三步：制备多个含淀粉的固体培养基．
第四步：将A、B组分别稀释后，分别在含淀粉的固体培养基上利用

 

法分离，适宜条件下培养得到单菌落．
第五步：观察A、B组各菌落周围的

 

．
实验结果预期：据诱发突变率低的特点，预期

 

；据诱发突变不定向性的特点，预期

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,利用微生物进行发酵来生产特定的产物

专题：

分析：获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的侵入，因此必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌．纯化微生物常用稀释涂布平板法和平板划线法，图中所示纯化分离枯草杆菌的方法是平板划线法．本实验的目的是利用诱变育种方法培育获得产生较多淀粉酶菌株．实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，所以要设计空白对照组，单一变量是诱变剂处理与否．

解答： 解：（1）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的侵入，因此必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌．在接种或倒平板操作时，除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外，还必须在酒精灯火焰旁操作，以防止空气中的杂菌污染．
（2）由图可知，该处纯化分离枯草杆菌的方法是平板划线法．
（3）本实验的目的是利用诱变育种方法培育获得产生较多淀粉酶菌株．实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，所以要设计空白对照组，单一变量是诱变剂处理与否，即将枯草杆菌分成A、B两组，A 组用诱变剂处理，B组不处理（作对照）．将A、B组分别进行一系列梯度的稀释后，分别在含淀粉的固体培养基上利用稀释涂布法分离，适宜条件下培养得到单菌落．本实验的原理是：菌株生长过程中可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈．所以实验最后可以通过观察A、B组各菌落周围的透明圈大小做出判断．因为诱发突变率低，预期A组多数菌落周围的透明圈与B组差异不显著；诱发突变具有不定向性，预期A组透明圈大小不一，B组较一致．
故答案为：
（1）防止外来杂菌的侵入         在酒精灯火焰旁操作
（2）平板划线法
（3）A 组用诱变剂处理，B组不处理（作对照）    稀释涂布法    透明圈大小
A组多数菌落周围的透明圈与B组差异不显著
A组有少数菌落周围的透明圈比B组明显小，有少数比B组明显大（或A组透明圈大小不一，B组较一致）

点评：本题考查微生物实验室培养的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间内在联系的能力；能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用．