研究表明.HER2/neu是一种原癌基因.它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达．抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长.目前已成为有效的生物治疗手段．(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点.是因为H蛋白在成年个体的正常组织中 (填“低表达或“高表达 )．H蛋白是一个跨膜蛋白.结构如图所示� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达．抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段．
（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中

（填“低表达”或“高表达”）．H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示．制备免疫小鼠所用的H蛋白（抗原）时，应构建

区基因，转入原核细胞表达并提纯．
（2）将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中获取相应在B淋巴细胞，然后与

细胞进行融合，使用的化学诱导剂是

，细胞融合的原理是

．
（3）将融合细胞在

培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长．对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和检测，经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞．
（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过

或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体．

考点：单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．
诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）．

解答： 解：（1）根据题意可知，H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达，因此原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中低表达；由于抗体主要存在于细胞外液中，因此根据H蛋白的结构图可知，若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因，由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区．
（2）在制备单克隆抗体过程中，需要将脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合，诱导其融合的试剂为聚乙二醇，其融合的原理是借助于细胞膜的流动性．
（3）将融合细胞接种在选择培养基中，从中选出杂交瘤细胞．
（4）将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养，获得大量的单克隆抗体．
故答案为：
（1）低表达胞外
（2）骨髓瘤 PEG（或“聚乙二醇”）细胞膜的流动性
（3）选择
（4）体外（培养）

点评：本题结合抑制癌症的材料考查了单克隆抗体的相关知识，要求考生能够从题干和题图中获取有效解题信息；识记单克隆抗体的制备过程以及细胞融合的诱导技术，识记单克隆抗体的优点等方面的知识．