题目内容
【题目】苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫作用的毒素蛋白。如图l是4种限制酶及其所识别的序列与酶切位点，图2是转Bt毒素蛋白基因棉花的培育过程示意图，图2中a和b分别表示抗卡那霉素基因和抗四环素基因(棉花细胞中不含抗卡那霉素基因和抗四环素基因)，据图回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因的原理是___________________，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成___________________，用此方法得到的所需目的基因至少要复制_____________次。
（2）基因工程的核心步骤是_________________，假设图2中质粒原来的BamH I识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶Bcl I识别位点的碱基序列，现用Bcl I和Hind Ⅲ切割质粒，则目的基因右侧还能选择BamH I进行切割，并获得所需重组质粒吗?_________，请说明理由_____________________________________。
（3）抗虫基因能在棉花细胞中表达，是因为不同生物共用____________ 。导入重组质粒的棉花细胞能在含____________________(填抗生素种类)的培养基上生长。
【答案】 DNA双链复制 引物 3 基因表达载体的构建 可以 切出的粘性末端相同 一套密码子 四环素
【解析】【试题分析】
本题考查基因工程的相关知识。解题时首先要正确识图，并从题目所给的图形中获取有效信息，例如要能看出“限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同”的信息，然后根据各小题的提示内容，梳理相关知识点，对各小题进行分析作答。
（1）利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA双链复制；利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物；根据DNA分子具有半保留复制的特点，可推知用此方法得到的所需目的基因至少要复制3次。
（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤；据图1可知，限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同，所以目的基因右侧仍然还能选择BamH I进行切割，并获得所需重组质粒。
（3）抗虫基因能在棉花细胞中表达，是因为不同生物共用一套密码子；据图2可知，Ti质粒和含目的基因的DNA均需用限制酶BamH I和Hind Ⅲ切割，这样会导致重组质粒上缺失a部分(抗卡那霉素基因)，而只含b部分（抗四环素基因），因此，导入重组质粒的棉花细胞能在含四环素的培养基上生长。
