题目内容
【题目】人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是__________________。科研人员还在两种引物的_______端分别加上了____________________和___________________________序列，以便于后续基因的剪切和连接。
（2）过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有____________。
（3）过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过__________过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是____________________________________________。
（4）科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是____________________________________。
【答案】干扰素基因两端的部分核苷酸序列 5′ GAATTC GGATCC 复制原点 逆转录 导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录（或干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞） 药物既有干扰素的治疗作用，又有人参的滋补作用
【解析】
本题以图文结合为情境，考查学生对基因工程的基本操作程序等相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。
(1) 利用PCR技术扩增目的基因的前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。图示中的干扰素基因为目的基因，因此在步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列。DNA的合成方向总是从子链的5ˊ端向3ˊ端延伸；由于在构建基因表达载体时，需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒，因此科研人员还在两种引物的5ˊ端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接。
(2) 基因表达载体的组成包括复制原点、目的基因、启动子、终止子、标记基因等，据此分析图示可知：过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有复制原点。
(3) 过程④为表示目的基因的检测和鉴定，在此过程中，利用反转录法合成目的基因时，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过逆转录过程获得DNA，再进行PCR扩增。干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录，均会导致不能检测出干扰素基因。
(4) 由于将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物，既有干扰素的治疗作用，又有人参的滋补作用，所以比单纯干扰素的疗效要好。
