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20.生物乙醇是以生物质为原料生产的可再生能源.我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇,其技术流程为纤维素酶分解-→酵母菌发酵-→蒸馏-→成品.纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取.某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程:土壤取样-→选择培养-→梯度稀释-→鉴别培养.请分析回答下列问题:
(1)最好选择纤维素含量丰富的土壤采集土样.
(2)配制培养基时,各种成分在溶化后分装前必须进行调整PH,接种前要进行高压蒸汽灭菌.在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒过来放置,这样做的目的是防止冷凝水污染培养基.
(3)以下是两种培养基配方:
A培养基配方:
KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O纤维素酶葡萄糖尿素琼脂
1.4g2.1g0.2g1g10.0g1.0g15.0g
B培养基配方:
KH2PO4NaNO3Na2HPO47H2O•MgSO47H2O•KCl纤维素粉酵母膏水解因素
0.9g1g1.2g0.5g0.5g5g0.5g0.5g
如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌,应选择B(填编号)培养基配方,从功能看该培养基属于选择培养基.
(4)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基中加入刚果红染液,将筛选获得的菌液稀释后接种到鉴别培养基上,然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养.

分析 1、培养基的制作过程是:计算、称量、溶化、调整pH、分装、灭菌.倒平板冷凝后,应将培养皿倒置.
2、选择培养基是指通过培养混合的微生物,仅得到或筛选出所需要的微生物,其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的.
3、刚果红染液可以与纤维素结合呈红色,纤维素酶可以分解纤维素,不能与刚果红反应呈红色.

解答 解:(1)筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样,所以应当到富含纤维素的天然环境中采集土壤样品.
(2)制作培养基时应该先调整pH,再进行高压蒸汽灭菌.倒平板冷凝后,应将培养皿倒置,防止冷凝水滴入培养基而污染培养基.
(3)筛选纤维素分解菌应该使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基.
(4)刚果红染液可以与纤维素结合呈红色,纤维素酶可以分解纤维素,不能与刚果红反应呈红色,所以在培养基上含有纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈.
故答案为:
(1)纤维素含量丰富
(2)高压蒸汽灭菌 倒过来 防止冷凝水污染培养基
(3)B 选择
(4)刚果红染液 透明圈

点评 本题主要考查微生物培养基的制作和目的微生物的筛选与分离,意在强化学生对相关知识点的识记与理解.

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