Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能.这是因为 A．Taq DNA 聚合酶能使扩增反应在 DNA 变性条件下进行 B．Taq DNA 聚合酶催化下的扩增反应不需要引物 C．Taq DNA 聚合酶使扩增反应不需要ATP D．Taq DNA 聚合酶能使扩增反应具有连续性题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能，这是因为

Ａ．Taq DNA 聚合酶能使扩增反应在 DNA 变性条件下进行

Ｂ．Taq DNA 聚合酶催化下的扩增反应不需要引物

Ｃ．Taq DNA 聚合酶使扩增反应不需要ATP

Ｄ．Taq DNA 聚合酶能使扩增反应具有连续性

【答案】

【解析】

练习册系列答案

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Taq DNA聚合酶是从一种嗜热细菌中分离提取的，该菌是1966年从美国黄石国家森林公园的一个热泉中发现的。实验表明，PCR反应时变性温度为95 ℃，50个循环后，Taq DNA聚合酶仍有65%的活性。Taq DNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR的前提条件，也是PCR技术能迅速发展和广泛应用的原因。Taq DNA聚合酶还具有逆转灵活性，其作用类似于逆转录酶。Taq DNA聚合酶表现为Mg²⁺依赖，该酶的催化活性对Mg²⁺浓度非常敏感。测定结果为MgCl₂浓度在2.0 mmol/L时该酶催化活性最高，此浓度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性，Mg²⁺过高就抑制酶活性，因而MgCl₂的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度。Taq DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性，而无3′→5′外切酶活性，它不具有校对活性。因而在PCR中如发生某些碱基的错配，该酶是没有校正功能的。Taq DNA聚合酶的碱基错配几率为2.1×10^-4。

(1)Taq DNA聚合酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以________加入，________（填“需要”或“不需要”）再添加。

(2)影响PCR反应的影响因素除引物、反应温度、时间和TaqDNA聚合酶浓度外，从材料中可知，还应有________。

(3)这种嗜热细菌能够在热泉中生存，这是________的结果。

(4)PCR中由碱基错配引起的变异属于________。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占________。

PCR技术最突出的优点是(　 )

A．原理简单　　　　　　　　　 B．原料易找

C．Taq DNA聚合酶具有耐热性　D．快速、高效、灵活、易于操作

PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶?

请回答有关问题:

(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用__________________?

(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的?

①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?

____________________________

②TaqDNA聚合酶的功能是____________________________?

③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________法和________法进行分离?

(3)从土壤中分离分解尿素的细菌时,应采取的措施是_______________,原因是__________________________________?

(4)相对于细菌分离,而DNA分子的分离和提取操作要复杂的多?

①在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:______________________?________________________?

②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么?

______________　　 ,　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ______?

(5)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在________中才能进行,并且要严格控制________条件?

(6)PCR中加入的引物有________种,加入引物的作用是________________?

(2012·南京模拟)酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域，下列有关叙述错误的是 (　　)

A.90℃高温会使Taq DNA聚合酶失去催化活性

B．制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法等

C．固定化酶在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性

D．固定化细胞可以催化一系列酶促反应

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