Question

下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是(　　)

A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐

B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面

C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱

D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5 mL收集一管，连续收集流出液

Answer 1

C

解析试题分析：加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐，关闭出口。用吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面；打开下端出口，使样品渗入凝胶床内。等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。加入磷酸缓冲液到适当的高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱。待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5 mL收集一管，连续收集流出液。
考点：考查蛋白质的分离。
点评：难度中等，熟记蛋白质分离和提取过程中样品的加入和洗脱。