Question

1．镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变．检测这种碱基序列改变必须使用的酶是（　　）

• A． DNA解旋酶
• B． DNA连接酶
• C． 限制性核酸内切酶
• D． RNA聚合酶

Answer 1

分析 首先这道题考点是选修本中的基因诊断，所谓的基因诊断就是用放射性同位素（如³²P）、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的．而检测样本中是否存在与探针序列互补的同源核酸序列，常用以下方法：
（1）限制性内切酶分析法． 此方法是利用限制性内切酶和特异性DNA探针来检测是否存在基因变异．当待测DNA序列中发生突变时会导致某些限制性内切酶位点的改变，其特异的限制性酶切片段的状态在电泳迁移率上也会随之改变，借此可作出分析诊断．
（2）DNA限制性片断长度多态性分析． 在人类基因组中，平均约200对碱基可发生一对变异（称为中性突变），中性突变导致个体间核苷酸序列的差异，称为DNA多态性．不少DNA多态性发生在限制性内切酶识别位点上，酶解该DNA片段就会产生长度不同的片断，称为限制性片段长度多态性（RFLP）．RFLR按孟德尔方式遗传，在某一特定家族中，如果某一致病基因与特异的多态性片断紧密连锁，就可用这一多态性片段为一种“遗传标志”，来判断家庭成员或胎儿是否为致病基因的携带者．甲型血友病、囊性纤维病变和苯丙酮尿症等均可借助这一方法得到诊断．
（3）等位基因特异寡核苷酸探针杂交法．遗传疾病的遗传基础是基因序列中发生一种或多种突变．根据已知基因突变位点的核苷酸序列，人工合成两种寡核苷酸探针：一是相应于突变基因碱基序列的寡核苷酸；二是相应于正常基因碱基序的寡核苷酸，用它们分别与受检者DNA进行分子杂交．从而检测受检者基因是否发生突变，以及是否有新的突变类型．

解答 解：A、解旋酶是在DNA复制和转录时要用的酶，无法检测基因的碱基序列，A错误；
B、DNA连接酶是用来连接目的基因与质粒，构建基因表达载体的工具酶，B错误；
C、根据题意，由于限制酶能够特异性识别碱基序列，因此可以用特定的限制性内切酶检测该基因的碱基序列是否发生了改变，C正确；
D、RNA聚合酶用于转录过程，D错误．
故选：C．

点评 本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够识记并区分不同酶的作用；掌握限制酶的作用特点，难度适中．