Question

Ⅰ．为提高某作物的耐盐性，采用农杆菌介导的转基因技术，将耐盐基因R导入受体细胞，经筛选和培养获得若干单拷贝（体细胞中只有1个耐盐基因）转基因耐盐植株，其中3株能在中盐浓度条件下开花结实．若对其中1株（甲）自交后代进行耐盐性检测，结果为耐高盐25株、耐中盐49株、不耐盐26株．请回答：
（1）农杆菌介导的转基因过程中，目的基因与质粒经相应的

 

切割，再用DNA连接酶连接，形成

 

．通常根据质粒中设计的抗生素

 

，在培养基中添加该种抗生素筛选转化细胞，再进行目的基因等的鉴定．
（2）甲自交后代中耐盐性状的分离比与单基因

 

（填“显性”或“不完全显性”或“完全显性”）遗传的性状分离比相同．由此推测转基因植株的耐盐性状是由核基因控制的，耐盐基因已整合到细胞核中的

 

上．
（3）若用R+表示有耐盐基因，R-表示无耐盐基因，则甲植株的基因型可表示为

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植,胚胎分割移植

专题：

分析：1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、基因分离定律的实质：在杂合子的细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；生物体在进行减数分裂形成配子时，等位基因会随着同源染色体的分开而分离，分别进入到两个配子中，独立地随配子遗传给后代．

解答： 解：（1）基因工程中，常用同一种限制酶切割目的基因和质粒，以产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接形成重组质粒．通常根据质粒中的标记基因（如抗生素抗性基因）来筛选转化细胞，再进行目的基因等的鉴定．
（2）甲自交后代中，耐高盐：耐中盐：不耐盐=1：2：1，与单基因不完全显性遗传性状的分离比完全相同（即AA：Aa：aa=1：2：1），这说明耐盐基因已整合到细胞核中的染色体上，因此遵循基因的分离定律．
（3）根据题甲自交后代的性状分离比可推测出甲相当于杂合子，即其的基因型为R⁺R^-．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶（或限制酶）　重组质粒　抗性基因
（2）不完全显性   　染色体
（3）R+R-

点评：本题考查基因工程、基因分离定律的实质及应用，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤；掌握基因分离定律的实质，能根据题干中分离比进行准确推断，再结合所学的知识准确答题．