Question

羊绒素有“软黄金”之称，内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊是我国的两大产绒品种．我国生物学家运用现代生物技术培育出了转基因绒山羊．其过程如图1所示：

（1）在辽宁绒山羊细胞中获取的IGF 一I基因在导入胚胎干细胞之前须

 

，这是基因工程操作的核心步骤，若该过程使用的质粒是双链闭合环状的DNA分子，用两种识别序列不同的限制酶M和N切割（识别序列和切割位点如图2），通过凝电泳分离分析得下表．

使用限制酶	酶切结果（单位：Kb）
酶M	1.0、5.0、10.0
酶M+酶N	1.0、2.0、3.0、4.0、5.0

（2）①在该质粒中，N酶的切割位点有

 

个．
 ②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接，连接后的序列是否能用M酶、N酶进行切割？

 

（填“能”或“不能”）．
（3）胚胎干细胞（ES）可由囊胚的

 

有分离培养获得．转基因胚胎干细胞培养过程中应定期

 

，防止细胞代谢产物对细胞自身造成危害．
（4）干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植人经

 

处理的代孕母羊体内．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物胚胎发育的过程

专题：

分析：根据题意和图示分析可知：质粒是环状DNA分子，酶M将质粒切割成三个DNA分子片段，所以酶M的切割位点有3个．酶M和酶N共切割成5个片段，所以酶N的切割位点是2个．由图2可知，酶M和酶N切割后的形成的黏性末端相同，故两者的末端可相互连接．

解答： 解：（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．
（2）①由分析可知，M酶的切割位点是3个，N酶的切割位点是2个．
②由图可知，M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接形成或，连接后的碱基序列与酶M或酶N的切割位点都不相同，故不能M酶或N酶切割．
（3）胚胎干细胞可由囊胚的内细胞团分离培养获得．配制的培养液要满足营养、适宜的温度、PH、渗透压等条件．因此，转基因胚胎干细胞培养过程中应定期更换培养液，防止细胞代谢产物对细胞自身造成危害．
（4）胚胎移植过程需要对代孕母羊做同期发情处理．
故答案为：
（1）构建基因表达载体（构建重组DNA分子）
（2）2   不能
（3）内细胞团 更换培养液 　
（4）同期发情

点评：本题考查胚胎工程相关知识，能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．