题目内容

【题目】生物柴油是一种可再生清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现,在微生物 M 产生的脂肪酶的作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。

1)欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应配制以_______________为唯一碳源的培养基,这种培养基从功能上看属于____培养基。

2)在微生物培养过程中,灭菌与消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外____。常用____法对玻璃器皿进行灭菌。

3)若测得稀释倍数为 106 的培养基中的平板上,菌落数的平均值为 254,则每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为 01mL_____。用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值_____(填小或大),原因是____________________________________

4)为降低生物柴油生产成本,可利用______________________________技术使脂肪酶能够重复使用。

【答案】植物油 选择 所有微生物(包括芽孢和孢子) 干热灭菌 2.54×109 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察的是一个菌落 固定化酶

【解析】

微生物的营养物质:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。培养基灭菌采用的最适方法是高压、高温、蒸汽灭菌法;游离态酶的稳定性差,并且难以回收利用,而固定化酶不但能够重复利用,还能提高产品质量。

1)筛选产脂肪酶的微生物M时,应该使用只有目的菌能够生存的,其他微生物不能生存的选择培养基,故培养基中应该添加植物油作为唯一碳源;从功能上看,这种培养基属于选择培养基。

2)在微生物培养过程中,灭菌和消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外所有的微生物的芽孢和孢子;玻璃器皿常采用的灭菌方法为干热灭菌。

3)该组同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为254,则每毫升样品中的菌株数=254×106÷0.1=2.54×109个;因当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察的是一个菌落,故用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值偏小。

4)由于固定化酶能使能够重复使用,因而可降低生物柴油生产成本。

练习册系列答案
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【题目】普通饲料通常具有含促生长剂、抗生素等添加剂的缺点,使用植物乳杆菌生产液体发酵饲料成为新的趋势,其具有安全、适口性好、提高饲料利用率、增强免疫力等优点。通过紫外线诱变可选育具有良好发酵性能的液体发酵饲料专用植物乳杆菌,大大提高了液体饲料发酵的效率。请分析回答:

1)该育种过程使用紫外线作为一种物理因素诱发_______________,由于紫外诱导可显著提高_______________,从而实现在短时间内获得更多的植物乳杆菌优良变异类型。

2)如图是植物乳酸杆菌在15 W紫外灯,距离25 cm下照射不同时间下的致死率曲线图,据图分析可得出结论_______________。实际育种过程中经过多次试验选择2分钟作为最佳照射时间。请推测选择的依据为_______________

3)将初步筛选的 10株菌分别扩增培养后再按 5%接种量接入到液体发酵饲料中37 ℃培养24 h,测定乳酸含量。结果如下表:

菌种

出发菌

UR-1

UR-2

UR-3

UR-4

UR-5

乳酸含量/

mmol·L-1

128±261

162±264

1287±22

185±261

1432±372

15203±121

菌种

UR-6

UR-7

UR-8

UR-9

UR-10

乳酸含量/

mmol·L-1

151±201

1368±191

1489±141

165±156

1361±096

①据表分析,在相同发酵条件下不同的植物乳杆菌乳酸产量不同,该现象说明基因突变具有_______________,因此优良植物乳杆菌菌株的筛选成为液体发酵的关键步骤。分析表中数据可知_______________菌种产乳酸量提高最为显著,其较出发菌株提高了约_______________

②该育种过程最后还需将入选突变菌株连续传代5次,每传一代分别进行液体发酵试验,从而测定发酵液中菌株的产乳酸含量,该步骤目的为_______________

4)请你说出使用液体发酵饲料减少抗生素的滥用会带来哪些优点:_______________

【题目】图甲为构建重组质粒过程中的三种备选质粒,其中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因。图乙为培育转AFPs基因(抗冻基因)番茄的示意图,外源DNA和质粒上均标出了酶切位点及相关抗性基因,请回答下列问题。

1)图甲中通常选用质粒C构建重组质粒,而不选用质粒A或质粒B,其中不用质粒A原因是____________________________________

2)据图乙分析,若需使用插入灭活法筛选并鉴定重组质粒,应优先选用限制酶_____切割目的基因和质粒。

3)从cDNA文库中获得的目的基因______(填“含有”或“不含有”)启动子和终止子。

4)在构建基因表达载体过程中常把两个启动子串联在一起形成双启动子,加在目的基因上游。双启动子作用是________________________

5)图乙农杆菌中的质粒应含有______,其作用是携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA。从分子水平检测AFPs基因是否成功表达的方法是_____________。若要获得抗冻能力更强的抗冻番茄,可以对AFPs基因进行改造,最终得到相应的蛋白质,该过程需用到______工程。

6)为使改造后的AFPs基因能够表达,人工设计质粒D并对它的多个酶切位点进行研究。若用HindⅢ酶或KpnⅠ酶单独切割质粒D,均获得一条长链,若用HindⅢ酶和EcoRⅠ酶同时切割,则获得2500bp12666bp片段,若用KpnⅠ酶和EcoRⅠ酶同时切割,则获得2250bp13166bp片段。若以HindⅢ酶切割位点为计算起点,则KpnⅠ酶切割位点与HindⅢ酶切割位点最短长度为_______EcoRⅠ酶的两个切割位点与HindⅢ切割位点的最短距离为_________

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