利用PCR技术扩增目的基因需要的条件是 ①含目的基因的DNA, ②DNA引物, ③四种脱氧核苷酸, ④DNA聚合酶, ⑤mRNA,⑥核糖体 [ ] A．①②③④ B．②③④⑤ C．①③④⑤ D．①②③⑥ 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

利用PCR技术扩增目的基因需要的条件是

①含目的基因的DNA；

②DNA引物；

③四种脱氧核苷酸；

④DNA聚合酶；

⑤mRNA；⑥核糖体

[　　]

A．①②③④

B．②③④⑤

C．①③④⑤

D．①②③⑥

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T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。

环状DNA示意图
A、B、C、D表示能与相应T—DNA链
互补、长度相等的单链DNA片段；
箭头指示DNA合成方向。
（1）为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含         的培养基上生长，成熟后目交，收获种子（称为T₂代）。
（2）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含         的培养基上，获得所需个体。
（3）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与         植株进行杂交，再自交         代后统计性状分离比。
（4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性         。
（5）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。
其过程是：提取         植株的DNA，用限制酶处理后，再用         将获得的DNA片段连接成环（如下图）。以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取         作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。

环状DNA示意图

A、B、C、D表示能与相应T—DNA链

互补、长度相等的单链DNA片段；

箭头指示DNA合成方向。

（1）为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含的培养基上生长，成熟后目交，收获种子（称为T₂代）。

（2）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含的培养基上，获得所需个体。

（3）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与植株进行杂交，再自交代后统计性状分离比。

（4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性。

（5）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。

其过程是：提取植株的DNA，用限制酶处理后，再用将获得的DNA片段连接成环（如下图）。以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

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