Question

12．图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点．下列有关叙述错误的是（　　）

• A． 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
• B． 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
• C． 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
• D． 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团

Answer 1

分析 关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来．
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（3）结果：形成黏性末端或平末端．

解答 解：A、目的基因两端都含有EcoRI限制酶的切割位点，质粒上也含有EcoRI限制酶的切割位点，因此在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ，A正确；
B、若将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后再用DNA连接酶连接，则形成的重组DNA中，目的基因两端应各含1个EcoRⅠ酶切位点，即重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；
C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；
D、图示质粒上只有一个EcoRⅠ限制酶切割位点，因此图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团，D正确．
故选：B．

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各种操作工具的作用，能结合图中信息准确判断各选项．