Question

【题目】有机化合物M是某河流水中主要的工业污染物，某兴趣小组欲从污水处理厂的污泥中分离获得能够分解有机化合物M的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解有机化合物M的细菌，在配制培养基考虑碳源时应该____，该培养基在接种前应该用____法灭菌。

（2）常用稀释涂布平板法进行微生物接种并计数，若当稀释倍数为105时平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数约为____个。运用该方法计数的结果往往比样品中实际数目低，原因是____。

（3）该兴趣小组在污泥中分离获得了酵母菌，如果利用其进行酒精发酵，会产生气泡且发酵液pH下降，请分析出现该现象的原因是：____。

（4）在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是____，其目的是____。

Answer 1

【答案】以有机化合物M为唯一碳源 高压蒸汽灭菌 2.5 X 107 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 气泡的产生是由于酵母菌通过无氧呼吸，将糖类等有机物转化为酒精，同时释放出二氧化碳；在酒精发酵过程中，产生的二氧化碳、多种酸性物质都会使pH 下降 无菌操作（防止外来杂菌污染） 防止培养物被杂菌污染、防止污染环境、避免感染操作者

【解析】

为了筛选可分解有机化合物M的细菌，在配制培养基应该以有机化合物M作为唯一碳源。

2、培养基灭菌一般都采用高压蒸汽灭菌法。

3、为了培养微生物进行活菌计数，常常采用稀释涂布平板法，这种方法计数的结果往往比样品中实际数目低，主要原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

4、在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，目的是防止培养物被杂菌污染、防止污染环境、避免感染操作者。

（1）为了筛选污泥中可分解有机化合物M的细菌，在配制培养基时应该以有机化合物M作为唯一碳源。培养基灭菌一般都采用高压蒸汽灭菌法。

（2）常用稀释涂布平板法进行微生物接种并计数，若当稀释倍数为105时平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数约为50÷0.2×105=2.5×107个。用稀释涂布平板法计数的结果往往比样品中实际数目低，主要原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）利用酵母菌进行酒精发酵时，其无氧呼吸会产生CO2的气泡，同时CO2溶解在发酵液中以及多种酸性物质的产生等都会导致发酵液pH下降。

（4）在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，这里的防污不仅仅是防止培养物被杂菌污染、更要注意防止对环境的污染和对操作者的感染。