Question

【题目】酵母菌是实际生产中的常用菌种，请回答下列问题：

（1）酵母菌在自然界中普遍存在，其异化作用类型为___________，其产生CO2的场所是___________。

（2）果酒制作过程中，需要酵母菌的参与。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵一般将温度控制在___________传统果酒发酵过程中，不需要刻意灭菌，原因为_____________________。

（3）现代工艺制作果酒时，为了满足卫生安全要求，需要进行严格的灭菌处理，而后加入酵母菌，某果酒制作企业供货商为其提供了干酵母样品，可通过___________法估测每克样品中的菌株数，实验过程如下：

分别取第3、4、5组试管的稀释液0.2mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297），（35、33、31），（36、7、2），不适合用于计数的为_________倍数的稀释液，用第3组稀释倍数进行计数得到的结果小于第4组的原因可能是_____________。计算第4组得到每千克样品中酵母菌数量大约为_____________。

Answer 1

【答案】 兼性厌氧 细胞质基质和线粒体基质 18℃-25℃ 在缺氧酸性的发酵液中，酵母菌可以生存，其它微生物无法生存 稀释涂布平板法 106 第3组实验中多个酵母菌连在一起最终形成单菌落，导致结果小于第4组 1.65×1010

【解析】试题本题考查果酒制作和微生物的分离与计数，考查对果酒制作原理、微生物分离、计数方法的理解。解答此题，可根据酵母菌代谢类型分析发酵过程中不需要刻意灭菌的原因，根据题图判断不同试管稀释倍数，进而计算每千克样品中酵母菌数量。

（1）酵母菌在有氧和无氧条件下均可以分解有机物，其异化作用类型为兼性厌氧型，无氧条件下在细胞质基质中产生二氧化碳，有氧条件下在线粒体中产生二氧化碳。

（2）酒精发酵的适宜温度为18℃-25℃。传统果酒发酵过程中，酵母菌在无氧条件下产生酒精，此时缺氧和酸性的发酵液中其他微生物难以生存，而酵母菌可以存活，因此发酵过程中不需要刻意灭菌。

（3）干酵母样品可通过稀释涂布平板法法估测每克样品中的菌株数。据图可知，第3、4、5组试管的稀释倍数分别为104、105、106，平板计数时，应选择菌落数为30～300的平板进行计数。稀释106倍的5号试管稀释液涂布的平板菌落数不在此范围内，不符合计数要求。

由于第3组稀释倍数较小，平板上连在一起的菌体会形成一个菌落，导致计数得到的结果小于第4组。第4组稀释液涂布的平板上菌落平均数为（35+33+31）/3=33，则每千克样品中酵母菌数量大约为33÷0.2ml×105×103=1.65×1010个。