Question

20．某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性．供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为正常肝细胞，乙细胞为肝肿瘤细胞．请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同．一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量少．
（2）在动物细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的主要作用是维持细胞培养液的pH值．
（3）在两种细胞培养过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现接触抑制（停止分裂增殖）现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的遗传物质（核型）可能会发生变化．药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞相比，可以传代的次数更多的是乙细胞．若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶消化处理．
（4）理论上，乙细胞可与某种B淋巴细胞融合成杂交瘤细胞，从而来制备单克隆抗体，使患者获得特异性免疫．

Answer 1

分析 动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．（3）温度和PH．（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的pH值）．

解答 解：（1）肝肿瘤细胞比正常肝细胞的分裂能力强，细胞周期短，因此在其他条件相同时，相同时间内肝肿瘤细胞产生的子代细胞多．
（2）细胞培养应在含有5%CO₂的恒温培养箱中进行，其中CO₂的作用是维持培养液pH．
（3）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现停止现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的遗传物质可能会发生变化．药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，乙细胞比甲细胞相比，可以传代的次数更多的是乙细胞．若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶消化处理．
（4）理论上，乙细胞可与某种B淋巴细胞合成杂交瘤细胞，从而来制备单克隆抗体，使患者获得特异性免疫．
故答案为：
（1）少
（2）维持细胞培养液的pH值
（3）接触抑制（停止分裂增殖）  遗传物质（核型）   乙   胰蛋白酶
（4）杂交瘤    单克隆抗体

点评 本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件，掌握动物细胞培养技术的相关应用，能运用所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查．