Question

10．科学家通过基因工程培育抗虫棉时，需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因，“放入”棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用，请回答下列有关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是限制性内切酶，此工具主要存在于微生物中，其特点是一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸系列，并在特定的点位切割．
（2）基因表达载体的组成除了有目的基因外，还必须有复制原点、启动子、终止子和标记基因．
（3）进行基因操作一般要经过的四个步骤是：获取目的基因，构建基因表达载体，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）从供体细胞中获取目的基因需要利用限制酶．限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端．
（2）基因表达载体的组成除了有目的基因外，还必须有复制原点、启动子、终止子、标记基因．
（3）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定．
故答案为：
（1）限制性内切酶    微生物  一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸系列，并在特定的点位切割．
（2）终止子   标记基因
（3）获取目的基因 构建基因表达载体  将目的基因导入受体细胞  目的基因的检测与鉴定

点评 本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理，掌握基因工程的具体操作步骤及各步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．