题目内容

15．已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A．现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如图．
（1）步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、碳源、氮源、无机物、生长因子等营养物质（至少写出3种）；该培养基是[A、C]（多选）．
A．固体培养基    B．液体培养基    C．通用培养基    D．选择培养基
（2）步骤一采用平板划线接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌．
（3）无论是培养基（液），接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行灭菌；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染．
（4）步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，预测可能的结果并推测结论：
①A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，两者未分离．
②A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ．
③B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ．
（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量测定结果都如55题中①的情况，则应重复步骤一和步骤二，再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止．

分析 解答本题需掌握：
1．培养基的概念、种类及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质．

（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2．无菌技术
（1）关键：防止外来杂菌的入侵．
（2）具体操作
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒．
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌．
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行．
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触．
3、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．
4、接种方法：平板划线法和稀释涂布法．

解答 解：（1）牛肉膏蛋白胨培养基中含有细菌生长所需的水、碳源、氮源、无机物、生长因子等营养物质；该培养基一般加琼脂制成固体培养基，并属于通用培养基．
（2）由图可知，步骤一采用平板划线法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌．
（3）无论是培养基（液），接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行灭菌；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染．
（4）若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，若A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，说明两者未分离；若A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ；若B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ．
（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量都下降，说明两种细菌还未分开，则需要重复步骤1和步骤2再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止．
故答案为：
（1）碳源、氮源、无机物、生长因子（任意三种，仅写出一种或二种不得分）    A、C
（2）平板划线     菌落     筛选、分离两种类型的细菌
（3）灭菌    防止杂菌污染
（4）②A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ
③B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ
（5）重复步骤一和步骤二

点评 本题主要考查微生物的实验室培养的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间内在联系的能力．

练习册系列答案
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8．科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因．其技术过程如下（图中的■代表基因前的启动子，启动子是基因（gene）的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度．启动子就像“开关”，决定基因的活动．），据图1回答：

（1）loxP是一种只有34个碱基对构成的小型DNA片段，是有两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成，自身不会表达，插入质粒后也不影响原有基因的表达，其碱基序列如下：

Cre酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的限制酶酶．从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的基因重组．
（2）将重组质粒导入到植物细胞后，通过脱分化和再分化两个过程可以形成完整的植株．作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上．
（3）经检测成功后，抗除草剂基因已没有用途，继续留在植物体内可能会造成的安全问题是抗除草剂基因可能转移到杂草中．经Cre酶处理后，质粒中的两个loxP序列分别被切开后，可得到如上图右侧的这两个DNA分子．由于抗除草剂基因前没有了启动子_的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失．
（4）loxP序列是有方向性的．如果经Cre酶处理后，发现抗除草剂基因反向连接在质粒一上，则原来质粒一中这两个loxP序列的方向是C．
A．两个都是正向  B．两个都是反向 C．一个正向一个反向  D．与方向无关．
9．某种二倍体动物的血型基因分别有KA、KB、KE、k，则这类动物的血型表现型与基因型种类数依次是（　　）
A．4种与7种B．6种与10种C．7种与10种D．8种与9种
3．用含32P的磷酸盐培养液培养洋葱根尖细胞，一段时间后，细胞的结构以及化合物中具有放射性的是（　　）
①核糖　②核膜　③核仁　④核酸．
A．②③④B．①③④C．②④D．①③
10．如图中①～③是从几种生物细胞中分离出来的几种有机物，③只表示某有机物的局部，请回答下列问题：

（1）①的中文名称是转运RNA，通常它的合成场所在细胞核．
（2）人体细胞中，物质②主要在细胞呼吸（或呼吸作用或有机物氧化分解）生理过程中产生，写出物质②的结构简式A-P～P～P．
（3）细胞中合成物质③的细胞器是核糖体，请在图上用框框标出肽键结构．
（4）人体中，物质③种类繁多，控制其差异的根源是基因（或DNA或遗传信息）的不同．
（5）综合上述分析，你认为以上物质①②③在哪个生理过程中会同时出现？蛋白质的合成（或遗传信息的转录和翻译）．
20．各种植物的开花都要求一定的黑暗和光照时间，但“影响开花的关键性因素是黑暗期的长短，还是光照期的长短”并不明确．人们很早就认识到，苍耳需要每天短于16h的日照才能开花，若日照时间长于16h就不开花，16h的光照是一个临界点．20世纪30年代，有人将苍耳置于不同组合的光照期和黑暗期中进行实验，结果如图1所示．

（1）图1所示实验中，各组处理的差异（变量）是黑暗时间的长短．根据本实验的结果，你认为对前人的认识应作何修正？影响苍耳开花的关键因素不是光照期的长短，而是每天长于8h的黑暗．
（2）有人进一步对此问题进行了研究，如图2所示．该实验是否支持你的上述结论是．并阐述理由图2所示实验表明决定苍耳开花的关键因素是黑暗期的长短而不是光照期的长短．
（3）进一步的实验（如图3所示）发现，在实验n处理的黑暗期中插入一段时间的光照，即使是极短的一瞬间，植物也不能开花；而在实验p处理的光照期间插入一段黑暗期，植物能够开花．图3未显示n，p实验的对照处理，请你参照图3画出对照组的处理．
（4）本实验除了题目中涉及到的控制因素外，为了保证实验结论的科学性和可靠性，你认为还应注意做到：（至少答出两点注意事项）①选择长势、大小相同的同种植物、②水肥、温度等培养条件相同或进行重复实验．
7．下列关于人体生命活动调节的叙述中，正确的是（　　）
A．内环境稳态的调节由消化、呼吸、循环、排泄四个系统共同完成
B．甲状腺激素的作用是通过分级调节和负反馈调节来实现的
C．细胞代谢旺盛、代谢产物增加时，组织液会增多、淋巴会减少
D．血浆渗透压的大小主要取决于血浆中无机盐和蛋白质的含量
4．某课外兴趣小组在一定浓度的二氧化碳和适宜的温度条件下，测定了在不同光照强度下某植物叶片在密闭的装置中二氧化碳含量的变化，结果如表．请分析问答下列问题．
光照强度（klx）03.05.07.08.010.0
二氧化碳变化量
（mg/h）		+2.0-2.0-6.0-10.0-12.0-12.0
（1）该实验研究的课题是探究光照强度对光合速率的影响，该实验中的自变量是光照强度．
（2）在光照强度为3.0klx时，叶肉细胞的光合速率大于（大于/小于/等于）呼吸速率．此时叶肉细胞中产生[H]的场所有类囊体薄膜、细胞质基质和线粒体基质．
（3）在7.0klx光照强度下10h，叶片光合作用制造的葡萄糖的量为81.8mg．
（4）根据该实验，可以得出的结论是密闭容器中的植物在一定的范围内光合作用随光照强度的增加而增加，超过一定的光照强度，光合速率不再增加．
3．下列与呼吸作用有关的叙述，正确的是（　　）
A．酵母菌无线粒体，但也可以进行有氧呼吸
B．与呼吸有关的酶需要经过内质网和高尔基体加工
C．破伤风杆菌在有氧和无氧时能进行呼吸作用，但产物不同
D．肝脏细胞呼吸作用产生的CO2来自于线粒体

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