Question

【题目】如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。

（1）用_____（方法）对制备的培养基进行灭菌，倒平板要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是______________________。

（2）图中选择培养基应以_____为唯一氮源，鉴别培养基还需添加_____作指示剂。

（3）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为 105的土壤样品溶液0．1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178 和 191。该过程采取的接种方法是______，每克土壤样品中的细菌数量为______×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较_____。

Answer 1

【答案】高压蒸汽灭菌法 防止皿盖上的水珠落入培养基，避免培养基中的水分过快地挥发 尿素 酚红 稀释涂布平板法 1．75 少

【解析】

微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌，倒平板要待平板冷凝后，为防止皿盖上的水珠落入培养基，避免培养基中的水分过快地挥发，应将平板倒置培养。
（2）筛选尿素分解菌，应在以尿素为唯一氮源的培养基进行培养，鉴别培养基还需添加酚红作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成红色。
（3）接种微生物常用稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法能对微生物进行计数，因此若要估算试管中菌种的数量，除了采用显微镜直接计数的方法外，还可采用稀释涂布平板法进行计数；在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为156、178、191三个平板符合计数要求，所以每克土壤样品中的细菌数量=（156+178+191）÷3÷0.1×105=1.75×108个，血细胞计数板计数获得的细菌数目包含了死菌和活菌，而稀释涂布平板法测的是活菌数目，故与血细胞计数板计数法相比，稀释涂布平板法测得的细菌数较少。