Question

菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：

(注：卡那霉素抗性基因(Kan^R为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感)
(1)质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是_______，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。
(2)下图限制酶M和N切割后产生的相同黏性末端是_______，连接它们所需要的基本工具是_______。

(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用_______处理：使其处于感受态。
(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及_______的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。
(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因(目的基因)两端的部分碱基序列设计特异引物，若其中一种引物一共用了31个，则目的基因最多扩增了_______次。
(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示。
请据表回答：

对照组应饲喂等量的___________________________________与人工饲料混合物。
表分析，______________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。

Answer 1

（1）环状DNA （2）GATC  DNA连接酶 （3）氯化钙溶液 （4）卡那霉素 （5）5
(6)非转基因菊花嫩茎及叶片 实验组和对照组死亡率

解析试题分析：（1）质粒为细菌细胞质的环状DNA。（2）据图分析, 限制酶M和N切割后产生的相同黏性末端是GATC。需要DNA连接酶连接。(3)可以用氯化钙溶液处理土壤农杆菌，使之处于溶液吸收周围DNA状态，即感受态。（4）标记基因对应性状用来筛选导入目的基因的受体细胞，故要将愈伤组织培养在含卡那霉素培养基，（5）每生成一条子链需要一个引物，引物一共用了31个，故共生成31条子链，加上原来的一条模板链，共有32条DNA链，有16个DNA，16=2⁵，故目的基因最多扩增了5次。（6）实验目的是探究转基因植株的杀虫效果，故自变量为转基因植株，实验组喂转基因植株，对照组应饲喂等量的正常植株。因变量为害虫数量，即实验组和对照组死亡率。
考点：本题考查基因工程相关知识和实验设计，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力；具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法能力。