Question

18．关于PCR技术的叙述，正确的是（　　）

• A． 设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列
• B． 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
• C． PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶
• D． PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应

Answer 1

分析 PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
2、原理：DNA复制．
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．

解答 解：A、设计扩增目的基因的引物时要考虑表达载体相关序列，从而保证目的基因能与表达载体相连接及正常表达，A错误；
B、只要设计出目的基因的引物，接下来即可自动进行，而不必知道其全部序列，B正确；
C、PCR技术需要特殊的耐高温的DNA聚合酶，从细胞内提取的DNA聚合酶不耐高温，C错误；
D、PCR过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．可见该过程中温度的周期性改变不都是为了DNA聚合酶催化不同的反应，D错误．
故选：B．

点评 本题主要考查基因工程中PCR技术等相关知识，意在考查了考生识记和理解所学知识的要点，试题难度中等．