Question

5．胡萝卜素是一种常用的食用色素，在保护视力方面具有重要功效．从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取胡萝卜素的流程图如下，请据图回答：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可用稀释涂布平板法法接种菌种；从功能上看，所用培养基为选择培养基．
（2）在培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可提供碳源、氮源等营养．
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素，干燥时应控制好时间和温度，以防止胡萝卜素分解；萃取时一般不直接用酒精灯加热而用水浴加热，因为温度过高萃取剂易燃易爆．在萃取液浓缩前需要进行过滤．
（4）用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素时需用胡萝卜素标准品作为对照．
（5）某同学通过植物组织培养获得无病毒高产胡萝卜植株，在操作时不慎污染了培养基．欲确定培养基上的微生物中是否含有纤维素分解菌，可将它们放在含刚果红染料且以纤维素为唯一碳源的培养基中培养鉴别．
（6）要提取与产生胡萝卜素有关的某种酶，可采用凝胶色谱法进行分离；若该酶相对分子质量较大，则其在色谱柱中移动速度较快．

Answer 1

分析 1、微生物营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，常用的接种方法向右稀释涂布平板法和平板划线法．
2、胡萝卜素的化学性质稳定，不溶于水，易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，常采用萃取法提取．提取流程为：胡萝卜-粉碎-干燥-萃取-过滤-浓缩-胡萝卜素-鉴定．胡萝卜素常用纸层析法进行鉴定．

解答 解：（1）微生物培养常用的接种法有：稀释涂布平板法和平板划线法．从功能上看，所用培养基为选择培养基．
（2）蔗糖可为酵母菌提供碳源，硝酸盐可酵母菌提供氮源．
（3）胡萝卜素不是很稳定，温度过高、干燥时间过长会导致其分解；由于萃取剂往往具有挥发性，且易燃烧，如果直接加热挥发出来的有机溶剂遇明火易燃烧爆炸；萃取液浓缩前需进行过滤，萃取后需将原料中的固体物滤去．
（4）用标准样品可对照检查提取出来的胡萝卜素的纯度．
（5）纤维素与刚果红染液反应呈红色，纤维素分解菌体内的纤维素酶能够将以纤维素为唯一碳源的培养基中的纤维素分解而不能出现红色，且在菌落周围出现无色的透明圈，所以刚果红染液可以鉴定纤维素分解菌．
（6）蛋白质的分离方法常用凝胶色谱法，由于蛋白质分子量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，先洗脱出来．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法  选择  
（2）碳源     氮源  
（3）时间和温度　　温度过高萃取剂易燃易爆       过滤   
（4）胡萝卜素标准品
（5）刚果红  纤维素
（6）凝胶色谱   较快

点评 本题主要考查微生物的培养和胡萝卜素的提取，意在强化学生对微生物培养和胡萝卜素的提取过程的识记、理解与运用．