Question

11．转基因实验表明，转入了海蜇绿色荧光蛋白基因的转基因鼠，在紫外线的照射下能像海蜇一样的发光．请回答下列问题：
（1）已知的绿色荧光蛋白基因是从海蜇体细胞中提取出的一种基因，提取它时通常利用的酶是限制性内切酶．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、模板DNA、4种脱氧核糖核苷三磷酸和热稳定DNA聚合（或Taq）酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
（3）若将含海蜇绿色荧光蛋白基因的重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞中，则常用的方法是显微注射技术．
（4）欲进一步将已导入了重组质粒的猪胎儿成纤维细胞培养成带有绿色荧光蛋白质的转基因猪，还需利用
细胞核移植（或体细胞核移植）技术，将导入了重组质粒的猪胎儿成纤维细胞的细胞核移植到去核的猪的卵母细胞中，从而形成重组细胞，再进一步培养成早期胚胎，通过胚胎移植技术转移到猪的子宫中，从而得到绿色荧光蛋白转基因克隆猪．
（5）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明目的基因（或抗枯萎病基因）已表达．如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中不一定（填“一定”或“不一定”）含有抗病基因．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）获取目的基因时通常利用限制酶．
（2）PCR技术的条件：引物、模板DNA、4种脱氧核糖核苷三磷酸和热稳定DNA聚合（或Taq） 酶．
（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．
（4）动物体细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎再经胚胎移植到受体子宫中，最终发育为克隆动物．
（5）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明目的基因（或抗枯萎病基因）已表达．叶绿体中基因的遗传属于细胞质遗传，因此把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案为：
（1）限制性内切酶
（2）模板DNA       热稳定DNA聚合（或Taq）
（3）显微注射技术
（4）细胞核移植（或体细胞核移植）     胚胎移植
（5）目的基因（或抗枯萎病基因）已表达     不一定

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．