题目内容

利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素,斜土为转基因实验过程示意图,其中数字表示相应过程。

天然大肠杆菌质粒一般含有LacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中除含有LacZ基因外,还含有氨苄青霉素抗性基因。

若lacZ基因完整,便可表达出β-半乳糖苷酶,β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落;若lacZ基因中插入了外源基因,带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。

(1)过程①②一般需要的限制性内切酶主要是从____________分离纯化出来的;过程③④需要______酶。

(2)检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型:蓝色菌落、白色菌落、无菌落形成。成功导入重组质粒的菌落的表现是________________。

(3)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外,还应加入____________等物质,用于筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(4)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用_____________处理细胞,使细胞处于一种____________的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。第二步是将____________与感受态细胞混合,在一定的温度下完成转化。

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