题目内容
【题目】有资料表明胃癌细胞中有胃泌素相关基因的表达，而且外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。某科研人员为验证外源性胃泌素的上述作用，以及进一步研究丙谷胺对其作用的影响，进行了以下实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。
（要求与说明：用细胞流式测定仪测定细胞周期分布；实验结果测定的具体操作不作要求；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）
（1）完善实验思路：
①将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养，每组若干，各组处理如下。
甲组：_______；
乙组：50μL丙谷胺溶液+50uL细胞培养液；
丙组：_______；
丁组：100L细胞培养液。
③将上述样品在适宜条件下进行培养。48h后取部分样品测定________，并记录。
④_______，并记录。
⑤对实验数据进行统计分析，结果如下。
表：胃泌素和丙谷胺对X型胃癌细胞增殖及细胞周期的影响
组别 | 72h，570nm | 48h，各时期细胞百分比（%） | ||
OD值 | G1 | S | G2+M | |
甲 | 0．767±0．025 | 55．60 | 25．20 | 19．20 |
乙 | 0．559±0．020 | 70．10 | 20．05 | 9．85 |
丙 | 0．585±0．022 | 68．60 | 21．10 | 10．30 |
丁 | 0．561±0．026 | 70．00 | 20．00 | 10．00 |
（注：OD值大小可体现细胞增殖情况；丁组细胞的细胞周期T=20h。）
（2）实验分析与讨论：
①用OD值作为检测细胞增殖指标的依据是_______。甲组与丁组数据比较，说明甲组的处理最可能是促进了S期细胞的________，从而促进肿瘤细胞增殖。乙、丁组数据几乎没有差异，但甲、丙组数据差异明显，可见丙谷胺具有________作用。
②据表中数据，在答题卷相应坐标系中画出丁组细胞中核DNA含量的周期性变化曲线，并将坐标系补充完整________________。
【答案】50uL置泌素+50uL细胞培养液 50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液 细胞周期分布/各时期细胞百分比 72h后取剩余样品（在570nm波长）测定OD值 细胞密度与（细胞悬液的）OD值呈正比/线性关系/OD值越大细胞数越多 DNA复制 对抗/抑制外源性胃泌素 
【解析】
题意分析，外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。本实验的目的是验证外源性胃泌素的上述作用，并且还要进一步研究丙谷胺对胃泌素促进生长作用的的影响，根据实验目的并结合题目中的信息可知实验中的自变量为胃泌素、丙谷胺以及胃泌素和丙谷胺三种不同因素的处理，因变量为OD值以及细胞周期中各期的变化，实验过程中无关变量要求相同且适宜。
（1）根据分析可知，补充实验如下：
①实验试剂的准备：将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养，每组若干，分组、编号，然后给与不同处理如下：
甲组中加入50uL胃泌素溶液+50uL细胞培养液；
乙组中加入50μL丙谷胺溶液+50uL细胞培养液；
丙组中加入50uL胃泌素溶液+50uL丙谷胺溶液；
丁组中加入100L细胞培养液。
③为保证无关变量的一致性，需要将上述样品在适宜条件下进行培养。根据题目中的实验结果可知，48h后取部分样品测定细胞周期分布/各时期细胞百分比，并记录。
④结合实验表格可知，72h后取剩余样品（在570nm波长）测定OD值，并记录。
（2）实验分析如下
①由于细胞密度与（细胞悬液的）OD值呈正比，故可用OD值的大小表示细胞数目的多少。甲组与丁组数据比较，处于S期的细胞的占比高于丁组，说明甲组胃泌素的处理最可能是促进了S期细胞的DNA复制，进而加快了后续的分裂过程，从而促进肿瘤细胞增殖。比较发现乙、丁组数据几乎没有差异，但甲、丙组数据差异明显，由此可推测丙谷胺具有对抗/抑制外源性胃泌素作用，从而对抗了胃泌素促进癌细胞生长的作用。
②绘图过程中需要根据表中的数据来绘制，故需要计算出细胞周期中各时期的长短，题意显示丁组细胞细胞进行有丝分裂，细胞周期为20小时，则G1经历时间为20×70%=14小时，此期进行DNA复制前的准备阶段，进行有关RNA和蛋白质合成；S期经历时间为20×20%=4小时，此期进行DNA分子的复制，故此期后DNA数目加倍；G2+M经历时间为20×10%=2小时，此期后形成新的子细胞，其中的DNA数目与原来亲代细胞的DNA数目相同，据此绘图如下：
名校课堂系列答案
