Question

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有

 

、

 

和

 

．
（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在

 

旁进行操作．接种后的培养皿倒置于37℃的

 

中培养．
（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于

 

培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的

 

使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：尿素分解菌广泛存在与土壤，其可以产生脲酶使尿素被分解成氨可使PH呈碱性，从而使添加酚红指示剂的鉴别培养基上的菌落周围会出现红色环带．分离尿素分解菌时常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌，灼烧灭菌，干热灭菌．在实验操作过程中，为防止杂菌污染操作要在酒精灯火焰旁操作，接种后的培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养．

解答： 解：（1）常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌，灼烧灭菌，干热灭菌．
（2）为避免杂菌污染，操作要在酒精灯火焰旁操作，为防止水蒸气在皿盖上凝结会产生水滴，在恒温培养箱中培养皿需要倒置培养．
（3）酚红指示剂可用于鉴定尿素分解菌，故培养基为鉴别培养基；尿素被分解成氨可使PH呈碱性，变色区域越大，说明分解能力越强；以尿素为氮源的培养基中菌落数少，因为其他微生物不能在该环境中生存．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌   灼烧灭菌   干热灭菌
（2）酒精灯火焰旁   恒温箱
（3）鉴别   氨    越强

点评：本题主要考查尿素分解菌的分离及微生物的灭菌方法等知识点，意在加强学生实验的无菌操作意识，提高实验技能．