Question

4．表是一种培养基的配方，请回答：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	琼脂	水
0.5g	1g	0.5g	2g	200ml

（1）培养基从物理性质来说，属于固体培养基．
（2）无菌操作是微生物培养最基本的要求，其中灭菌指的是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子．对于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是⑤③②①④⑥．（填代号）
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
（3）在平板划线法中，每次灼烧接种环的目的杀死上一次划线结束后残留在接种环上的菌种；
（4）稀释涂布平板法统计菌落数目时，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2ml，稀释倍数为10⁵时，则每毫升样品中的菌落数为2.5×10⁷．
（5）以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，利用这一特点，可准确地鉴定该种细菌能够分解尿素．

Answer 1

分析 1、消毒和灭菌：
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．
消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程；常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等．
2、培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类．
3、常用的固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数．酚红指示剂可以鉴定尿素分解菌．

解答 解：（1）固体培养基与液体培养基的区别就是固体培养基中含有凝固剂琼脂，表中的培养基配方中含有琼脂，所以是固体培养基．
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程．高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌．干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌．无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌．微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌．煮沸灭菌通常不能彻底杀灭一些微生物的孢子和芽孢，一般适用于餐具或不耐高温的食品等的消毒，巴氏消毒法适合对牛奶消毒．所以题中所给的项目所采用的灭菌和消毒方法依次是⑤③②①④⑥．
（3）在平板划线法中，每次灼烧接种环的目的杀死上一次划线结束后残留在接种环上的菌种，使下一次划线的菌种来自上一次划线的末端．
（4）稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．每毫升样品中的菌落数为50÷0.2×10⁵=2.5×10⁷．
（5）尿素分解菌产生的脲酶可以将尿素分解为氨使pH升高，从而使酚红指示剂呈红色，利用这一特点，可准确地鉴定该种细菌能够分解尿素．
故答案为：
（1）固体
（2）用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子                 ⑤③②①④⑥
（3）杀死上一次划线结束后残留在接种环上的菌种
（4）30-300      2.5×10⁷
（5）酚红     变红

点评 本题主要考查微生物实验过程的消毒、灭菌、接种方法、计数等知识，意在强化学生相关知识点的识记与理解．