由于人突变细胞中含胸苷激酶(TK)而缺乏HGPRT酶.小鼠正常细胞中含HGPRT酶而缺乏TK.两种细胞均不能在HAT培养基中生长.但可在普通培养基中生长．利用上述两类细胞融合获得杂种细胞.在杂种细胞传代过程中.鼠的染色体被保留下来.人的染色体随机丢失.以至最后只剩一条或几条人染色体(如图.图中数字代表保留的人染色体编号)．� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

由于人突变细胞中含胸苷激酶（TK）而缺乏HGPRT酶，小鼠正常细胞中含HGPRT酶而缺乏TK，两种细胞均不能在HAT培养基中生长，但可在普通培养基中生长．利用上述两类细胞融合获得杂种细胞，在杂种细胞传代过程中，鼠的染色体被保留下来，人的染色体随机丢失，以至最后只剩一条或几条人染色体（如图，图中数字代表保留的人染色体编号）．科研人员运用这一方法确定了胸苷激酶基因所在的染色体．分析回答：
（1）细胞融合技术的意义是

．人、鼠细胞混合在一起，经融合（只考虑两两融合）过程后共有

种细胞．与植物原生质体融合过程相比，过程A特有的诱导方法是

．
（2）动物细胞培养过程中，培养液中添加一定量的抗生素的目的是

，培养箱中充入5%的CO₂气体的主要作用是

．过程B用HAT培养基进行培养，目的是

．
（3）染色体的主要组成成分是

，人鼠杂种细胞中除染色体外含有遗传物质的结构是

．
（4）为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中，人鼠融合细胞应在

（填“HAT”或“普通”）培养基中传代培养．
（5）若将某次实验获得的各种人鼠杂种细胞分别在HAT培养基中培养，一段时间后，发现在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长，检查杂种细胞中保留的人染色体情况如表（表中“+”表示有相应染色体，“-”表示无相应染色体）：根据表中信息，可推测人细胞中胸苷激酶基因位于

号染色体上．

杂种细胞	保留的人染色体
杂种细胞	2号	3号	5号	9号	12号	17号	21号
A	+	+	+	+	-	+	-
B	-	+	-	-	+	+	-
C	+	-	+	-	+	+	+

考点：动物细胞与组织培养过程,细胞融合的概念及方法

专题：

分析：1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：

项目	细胞融合原理	细胞融合方法	诱导手段	用途
植物体细胞杂交	细胞膜的流动性，（细胞的全能性）	去除细胞壁后诱导原生质体融合	离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导	克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合	细胞膜的流动性	使细胞分散后，诱导细胞融合	离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导	制备单克隆抗体的技术之一

2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
3、分析表格：A、B、C三种杂种细胞共有的染色体是17号染色体．

解答： 解：（1）细胞融合技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍；人、鼠细胞混合在一起，经融合（只考虑两两融合）过程后共有5种细胞，即人体细胞自身融合的细胞、小鼠细胞自身融合的细胞、人和鼠细胞融合形成的细胞、未融合的小鼠细胞、未融合的人体细胞．植物原生质体融合的诱导方法有物理法和化学法，而诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法，因此与植物原生质体融合过程相比，过程A特有的诱导方法是生物法，即用灭活的病毒处理．
（2）动物细胞培养过程中，培养液中添加一定量的抗生素的目的是防止杂菌污染；培养箱中充入5%的CO₂气体的主要作用是维持培养液适宜的pH．人体细胞和小鼠细胞都不能在HAT培养基上单独生存，但两者的融合细胞可以在HAT培养基上生存，因此过程B用HAT培养基进行培养的目的是筛选出人鼠融合细胞（杂种细胞）．
（3）染色体的主要成分是蛋白质和DNA；在动物细胞中，DNA主要分布在细胞核中，此外在线粒体中也有少量分布．
（4）突变细胞和正常细胞都不能在HAT培养基上生长，但都能在普通培养基上生长，因此为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中，人鼠融合细胞应在普通培养基中传代培养．
（5）在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长，而A、B、C三种杂种细胞共有的染色体是17号染色体，据此可推知人细胞中胸苷激酶基因位于17号染色体上．
故答案为：
（1）克服不同生物远缘杂交（不亲和）的障碍      5      用灭活的病毒处理
（2）防止杂菌污染   维持培养液适宜的pH   筛选出人鼠融合细胞（杂种细胞）
（3）DNA和蛋白质       线粒体
（4）普通
（5）17

点评：本题结合图表，考查动物细胞工程的相关知识，要求考生识记动物细胞融合的方法，能对动植物细胞融合进行比较；识记动物细胞培养的条件，能结合图表中信息准确答题．