题目内容

多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。

(1)DNA的两条链是反向平行的,通常将____________的末端称为5’端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的_________开始延伸DNA链。

(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到__________________,它的发现和应用解决了上述问题;要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫 ___________________________。

(3)PCR的每次循环可以分为__________________三步。假设在PCR反应中,只有一个DNA片

    段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有_________个这样的DNA片段。

(4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。

 

 

(5)简述PCR技术的主要应用。

 

 

 

 

(1)磷酸基团(1分)   3,端(1分) (2)耐高温的TaqDNA 聚合酶(1分)     选择培养基(1分)        (3)变性、复性和延伸(1分)   32 (1分)    (4)(标出4个DNA分子1分,标对引物2分)(3分)

(5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定(要求3项以上)

 

练习册系列答案
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回答有关PCR的问题:(1)多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:         

A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现

B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

 (2)图示样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增,可以获取大量DNA克隆分子。

请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处:

                                                                        

                                                                                                                                               

(3)你打算扩增下图所示的两段序列之间的 DNA ,请从所列出引物中选出合适的一对,

5’-GACCTGTGGAAGC  CATACGGGATTG-3’

3’-CTGGACACCTTCG  GTATGCCCTAAC-5’

引物 1                        引物 2

5’-GACCTGTGGAAGC        5’-CATACGGGATTG

5’-CTGGACACCTTCG        5’-GTATGCCCTAAC

5’-CGAAGGTGTCCAG        5’-GTTAGGGCATAC

5’-GCTTCCACAGGTC        5’-CAATCCCGTATG

答:引物 1 :                         ;    引物 2 :                        

 

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