Question

【题目】绿色荧光蛋白（GFP）能在蓝光的激发下发出荧光，这样可借助GFP发出的荧光来跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠。请回答问题：

（1）在构建GFP基因表达载体的过程中需要用到的工具酶是________________________。

（2）将基因表达载体导入小鼠受精卵中常用的方法是_____________；受精卵在体外培养时，培养液中除了加水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸等分泌的营养成分外，往往需要特别加入_____________，同时在含5%_____________的无菌、恒温培养箱中进行培养。

（3）在胚胎移植前，通过_____________技术可获得较多的胚胎。在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行_____________处理，使供、受体的生理状态相同。

（4）由于荧光蛋白在自然界中不存在，所以科学家通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程最终是通过设计_______________________________________序列来完成的。

Answer 1

【答案】 限制酶和DNA连接酶 显微注射法 血清 CO2 胚胎分割 同期发情 荧光蛋白基因的脱氧核苷酸

【解析】【试题分析】

本题主要考查基因工程、蛋白质工程和胚胎工程的相关知识。需要考生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系。在解题时只要根据题意认真梳理所学基础知识，即可顺利作答。

（1）在构建GFP基因表达载体的过程中需要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶。

（2）将基因表达载体导入动物受精卵中常用的方法是显微注射法；受精卵在体外培养时，需要向培养液中添加血清等天然物质，同时在含5%CO2的的无菌、恒温培养箱中进行培养，其中CO2的作用是调节细胞培养液的pH。

（3）胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。所以在胚胎移植前，常通过胚胎分割技术获得较多的胚胎；在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行同期发情处理，使供、受体的生理状态相同。

（4）由于基因决定蛋白质，因此，要对荧光蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过设计荧光蛋白基因的脱氧核苷酸序列来完成。