题目内容
利用基因工程技术，可以使目的基因上特定的碱基发生替换，从而产生定向变异以获得性 能更优异的蛋白质，其基本过程如图所示，请回答：（1）参照PCR技术，可用
（2）乙过程是表示在DNA聚合酶作用下DNA链延伸，要形成闭合环状DNA分子，还需要
（3）丙和丁过程表示质粒分别导入目的细胞，进行增殖并
考点：PCR技术的基本操作和应用
专题：
分析：1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）原理：DNA复制．
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．
2、DNA分子的复制方式：半保留复制．
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）原理：DNA复制．
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．
2、DNA分子的复制方式：半保留复制．
解答：
解：（1）PCR反应过程中，通过高温破坏DNA分子双链之间的氢键，进而使DNA双链解开，因此可用加热方法使质粒DNA双链解开；甲过程中加人的一定长度的核苷酸链，其中一个位置碱基C替代了碱基A，其它的序列与目的基因的一条链互补，该多核苷酸链在质粒DNA复制中作为引物．
（2）连接DNA之间的磷酸二酯键需要DNA连接酶的参与．
（3）丙和丁过程表示质粒分别导入目的细胞，进行增殖及表达（转录和翻译）．由图示可知，乙过程中形成的闭合环状DNA分子中有一条链是原来正常的核苷酸链，另一条链是发生特定的碱基替换的核苷酸链，由于DNA复制是半保留复制，因此经多代繁殖后，能指导突变蛋白质产生的质粒占总数的
．
故答案为：
（1）加热 引物
（2）DNA连接酶
（3）表达
（2）连接DNA之间的磷酸二酯键需要DNA连接酶的参与．
（3）丙和丁过程表示质粒分别导入目的细胞，进行增殖及表达（转录和翻译）．由图示可知，乙过程中形成的闭合环状DNA分子中有一条链是原来正常的核苷酸链，另一条链是发生特定的碱基替换的核苷酸链，由于DNA复制是半保留复制，因此经多代繁殖后，能指导突变蛋白质产生的质粒占总数的
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故答案为：
（1）加热 引物
（2）DNA连接酶
（3）表达
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点评：本题结合图解，考查PCR技术、DNA分子的复制，要求考生识记PCR技术的概念、原理、过程及条件；掌握DNA分子复制的方式，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．
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细胞中核糖体存在的部位为（ ）
①高尔基体 ②粗面内质网 ③细胞核外膜 ④叶绿体外膜．
①高尔基体 ②粗面内质网 ③细胞核外膜 ④叶绿体外膜．
| A、①② | B、②③ | C、③④ | D、②④ |
下列有关固定化酶和固定化细胞的说法，错误的是（ ）
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PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增．你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是（ ）
①稳定的缓冲液环境 ②DNA模板 ③合成引物 ④四种脱氧核苷酸
⑤DNA聚合酶 ⑥DNA解旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备．
①稳定的缓冲液环境 ②DNA模板 ③合成引物 ④四种脱氧核苷酸
⑤DNA聚合酶 ⑥DNA解旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备．
| A、①②③④⑤⑥ |
| B、①②③④⑤⑥⑦⑧ |
| C、③④⑤⑥⑧ |
| D、①②③④⑤⑧ |
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