Question

【题目】已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产，回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用__________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用__________法进行计数。

（3）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，__________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定酶的最适温度，应围绕__________℃设计后续实验。

Answer 1

【答案】 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法 血细胞计数板 稀释涂布平板 45 40

【解析】试题分析：植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应采用压榨法或萃取法。测定微生物细胞数量的方法很多，有分光光度法、显微镜直接计数法（也称血细胞计数板法）和稀释涂布平板计数法；分光光度法比较简便，易操作，但是会使数据严重偏大。若要测定培养液中微生物的菌体数，可在显微镜下用血球计数板直接计数；若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数。测定微生物数量，可以用显微镜直接计数或稀释涂布平板法。

（1）微生物A菌体中的油脂通常可用用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ检测，苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。萃取法是指利用溶质在互不相溶的溶剂里溶解度的不同，用一种溶剂把溶质从另一溶剂所组成的溶液里提取出来的操作方法，微生物A产生的油脂不易挥发，可选用萃取法从菌体中提取。

（2）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用血球计数板直接计数；若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数。

（3）降解10g油脂所需的酶量越多，该酶的活性越小，由题干可知，45℃条件下，所需要的酶量最多，酶活力最小。40℃条件下，所需的酶量最小，酶的活性最高，为了进一步确定酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验。