Question

【题目】某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因与GFP基因连接获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4为四种限制酶。下列说法错误的是：

A. 据图推断，在将甲插入质粒时，使用了E1和E4两种限制酶

B. GFP基因可以认为是标记基因

C. 将P1转入体外培养的牛皮肤细胞，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了转录和翻译

D. 为了获得含有甲的牛，需将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的正常卵细胞中、在进行体外培养、胚胎移植等

Answer 1

【答案】D

【解析】

对题图进行分析可知，图示为表达载体P1，含有启动子、标记基因（GFP基因）、目的基因（LI基因）和终止子。

由题图可知，E1~E4为四种限制酶，产生的黏性末端各不相同，LI–GFP融合基因两侧是限制酶E1、E4的酶切位点。在将甲插入质粒时，使用了E1和E4两种限制酶，既保证了甲的完整，又防止了甲的自身环化，保证了甲与载体的正确连接，A正确；标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。GFP基因可表达出荧光蛋白GFP，该荧光蛋白在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，根据绿色荧光可以进行筛选，因此GFP基因是标记基因，B正确；将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明该细胞中合成了荧光蛋白，进而说明目的基因（LI基因）已经表达，即在牛皮肤细胞中完成了遗传信息的转录和翻译过程，C正确；将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的去核的卵母细胞中，形成重组细胞，并促使其分裂发育为早期胚胎，再将早期胚胎植入代孕母牛的子宫中，由它孕育并产生含有甲的牛，D错误。因此，本题答案选D。