Question

9．已知甲作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡．因此可将丙种蛋白质基因转入到甲作物体内获得抗虫植株．下列说法不正确的是（　　）

• A． 用含丙种蛋白基因的重组质粒的农杆菌感染甲作物叶片，则甲种子含丙种蛋白基因
• B． 可以采用化学合成或者从基因文库中提取等多种方法获取目的基因
• C． 在构建重组质粒的过程中，需要使用限制酶和DNA连接酶
• D． 可以通过多种方法来检测目的基因已经成功导入受体细胞

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、直接用含有丙种蛋白基因的重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，可在叶片部分细胞中合成丙蛋白，该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒，所以不含有丙中蛋白质的基因，A错误；  
B、获得目的基因的方法有①从基因文库中获取，②利用PCR技术扩增，③人工化学合成，B正确；
C、在构建重组质粒的过程中，需要使用同一种限制酶和DNA连接酶，C正确；  
D、可以通过DNA分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术等多种方法来检测目的基因已经成功导入受体细胞，D正确．
故选：A．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，掌握获取目的基因的几种方法，能根据题干要求准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查．