Question

19．下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中不正确的是（　　）

• A． 血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过颜色来判断什么时候应该收集洗脱液
• B． 用生理盐水重复洗涤红细胞
• C． 血红蛋白释放后应低速短时间离心
• D． 不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的PH范围内，以维持其结构和功能

Answer 1

分析 血红蛋白提取和分离实验
1、原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．
2、用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能．
3、分离血红蛋白溶液时，将搅拌好的混合液转移到离心管中，经过中速长时离心后，可明显看到试管中溶液分为4层，从上往下数，第1层为甲苯层，第2层为脂溶性物质的沉淀层，第3层为血红蛋白水溶液，第4层为杂质沉淀层．
4、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果．
5、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液，④透析．（2）凝胶色谱操作：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．（3）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳．
6、电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定．

解答 解：A、血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，A正确；
B、洗涤红细胞时，应该用等渗溶液，即用生理盐水重复洗涤红细胞，B正确；
C、血红蛋白释放后应中速长时间离心，C错误；
D、不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的PH范围内，以维持其结构和功能，D正确．
故选：C．

点评 本题考查蛋白质的提取和分离，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的方法等，要求考生在平时的学习过程中注意积累．