Question

18．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O₂和CO₂，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．请回答下列有关问题：
（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．
①加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
②以上所述的过程即是样品处理，它包括红细胞的洗涤、进行纯度鉴定、分离血红蛋白溶液．
（3）收集的血红蛋白溶液要进行粗分离，其方法是血红蛋白的释放．
（4）然后通过法将样品纯化，样品纯化的目的是透析、凝胶色谱去除大分子杂质蛋白．最后经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳进行纯度鉴定．
（5）电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离．

Answer 1

分析 血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．
样品处理包括四个步骤，即红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析．
透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以让小分子可以自由进出，而大分子不能通过．
样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的蛋白质除去．

解答 解：（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固．
②样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步．
（3）①透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白．
②透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内．
（4）样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，最后经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳进行纯度鉴定．
（5）电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离．
故答案为：
（1）样品处理  纯化  纯度鉴定
（2）①防止血液凝固
②血红蛋白的释放
（3）透析
（4）凝胶色谱去除大分子杂质蛋白      SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳
（5）大小

点评 本题难度一般，要求考生能够识记蛋白质的提取和分离的相关知识，考查学生对蛋白质的提取和分离实验操作步骤的识记和理解．