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玉米中赖氨酸的含量较低,原因是赖氨酸合成过程中,天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响.为此,有人通过基因修饰或合成,获得赖氨酸高产的玉米.请回答:
(1)将改造后的基因在体外大量扩增,常用的方法是
 
.在基因改造后,构建基因表达载体时需要用到的2种工具酶是
 
 

(2)将改造后的基因导入玉米时,常用
 
法,它与常见的双子叶植物的导入方法不同.一般情况下,导入目的基因后,是否可以稳定表达其遗传特性,还需要进行检测与鉴定,检测对象是
 
,有时还要进行个体生物学水平的鉴定.
(3)进行上述基因改造后的玉米体细胞,再通过
 
技术得到高产赖氨酸的玉米植株.
考点:基因工程的原理及技术
专题:
分析:DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体.
将目的基因导入植物细胞:
(1)农杆菌转化法(约80%的转基因植物都是用这种方法获得的)
①农杆菌特点:易感染双子叶植物和裸子植物,对单子叶植物没有感染力;Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上.
②转化:目的基因插人Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.
(2)基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高.
(3)花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法.
(我的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)
解答: 解:(1)扩增目的基因常用的方法是PCR技术.在基因改造后,构建基因表达载体时,首先需要用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体,再利用DNA连接酶将两者连接成重组质粒.
(2)在目的基因导入受体细胞时,双子叶植物一般利用农杆菌转化法,单子叶植物一般运用基因枪法.玉米属于单子叶植物,因此一般常用基因枪法将改造后的基因导入玉米.目的基因的检测与鉴定包括分子水平上的检测和个体水平上的鉴定定.
(3)进行上述基因改造后的玉米体细胞,再通过植物组织培养技术得到高产赖氨酸的玉米植株.
故答案为:
(1)PCR技术    限制性核酸内切酶    DNA连接酶
(2)基因枪法    目的基因表达出的蛋白质
(3)植物组织培养
点评:本题考查了基因工程的有关知识,要求考生能够识记基因工程的操作工具;掌握目的基因导入受体细胞的方法,特别是单子叶植物和双子叶植物的区别,再结合所学知识准确解题.
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