题目内容

动物脑组织中含有丰富的谷氨酸脱羧酶,能催化1mol谷氨酸分解为1mol r一氨基丁酸和1mol CO2.某科研小组从小鼠的脑中得到该酶后,在最适条件下,对该酶的催化反应过程进行研究,结果见图A和图B.
根据以上实验结果,回答下列问题:

(1)A图中曲线表示产物CO2浓度随时间变化的曲线,则该实验的自变量是
 
,因变量为
 
,无关变量是
 

(2)针对图B的结果,你认为该实验最初探究的问题可能是
 
,做出的假设是
 
,从反应物的角度分析,得到该实验结果的前提条件是
 

(3)在图A中画出反应过程中谷氨酸浓度随时间变化的曲线(请用“1”标注).
 

(4)重金属离子能与谷氨酸脱羧酶按比例牢固结合,不可解离,可迅速使酶失活.在反应物浓度过量的条件下,向反应混合物中加人一定量的重金属离子后,请在图B中画出酶催化反应速率随酶浓度变化的曲线(请用“2”标注).
 

(5)若将反应条件中的温度降低10℃,请在图A中画出CO2浓度随时问变化的曲线(请用“3”标注).
 
考点:探究影响酶活性的因素
专题:
分析:据图A分析,可知曲线为产物浓度随时间变化的曲线,时间为自变量,因变量为产物浓度.
图B中自变量为酶的浓度,因变量为酶促反应的速率,所以探究的问题应该是酶浓度对酶促反应速率的影响.
解答: 解:(1)分析图A曲线可知,曲线为产物浓度随时间变化的曲线,时间为自变量,因变量为产物浓度,因此实验的无关变量包括酶浓度、温度、PH等.
(2)图B中自变量为酶的浓度,因变量为酶促反应的速率,所以探究的问题应该是酶浓度对酶促反应速率的影响.做出的假设是酶的浓度越高,酶促反应的速度越快,从反应物的角度分析,得到该实验结果的前提条件是反应物过量(充足).
(3)随着酶促反应的进行,产物越来越多,底物则越来越少,所以谷氨酸浓度越来越低,到反应结束时变为0.
(4)根据题意,一定量的重金属离子可以导致一定量的酶失去活性,因此反应体系中必须加入足够多的酶,直至所有的重金属离子全部与酶结合之后,再加入的更多的酶才能让这个反应继续.
(5)题中所述,已有的曲线是在最适条件下绘制而成,若提高10℃,则酶的活性有所降低,反应完成的时间会有所滞后,但最终生成物的总量并不变,所以曲线表示出反应推后完成,总产物量不变即可.
故答案为:
(1)时间   物质浓度   酶浓度、温度、PH等(答对两项或两项以上才给分)
(2)酶的浓度对酶促反应速度有何影响?酶的浓度越高,酶促反应的速度越快   反应物过量(充足)
(3)见曲线l      
(4)见曲线2(评分标准:平移格数无具体要求,突出按一定比例下降就可以)
(5)见曲线3 (评分标准:达到最高值的时间无具体要求,突出趋向就可以)
点评:本题考查影响酶促反应速率的因素,难度适中,要求考生明确酶浓度时影响酶促反应速率的重要因素之一;此外③④⑤三题中绘制曲线对学生的能力提出了较高的要求,学习中要多加以训练.
练习册系列答案
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如图表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:

(1)用图1中的外源DNA(含有目的基因D)和图2中的质粒构建重组质粒需要使用限制酶和
 
.前者(酶)的专一性很强,其作用特点是
 

(2)应该使用限制酶BamHⅠ同时处理质粒、外源DNA,而不选择其他3种,原因在于
 
.(多选) A.若使用SmaⅠ或者MspⅠ会破坏目的基因.
B.若使用SmaⅠ切割质粒,能成功切开质粒得到粘性末端的可能很低.
C.若使用MboⅠ切割质粒,质粒上会有2处被切开,会将质粒切成两段不利于筛选.
D.使用限制酶BamHⅠ能保证目的基因和质粒获得相同的粘性末端,以便目的基因和运载体定向连接,不至于反向连接.
E.使用BamHⅠ切割质粒,质粒上会有1处被切开,破坏抗生素A抗性基因,保留抗生素B抗性基因,以便于将来筛选含目的基因的受体细胞.
F.只有使用BamHⅠ切割,才能保证质粒和目的基因上产生相同的粘性末端.
(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有
 
种不同DNA片段.若同时用限制酶MspⅠ、MboⅠ切割图2中的质粒,则可得到
 
个DNA片段.
(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,一般可进行如下步骤筛选:
第一步:将大肠杆菌在含
 
的培养基上培养,得到如图3的菌落.
第二步:再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含
 
的培养基上培养,得到如图4的结果(空圈表示与图3对照无菌落的位置).
第三步:选出图3培养皿中的某些菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌.请在图3中圈出含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落
以上筛选方式至少需要两步,其实还有其他更简单的操作方法.请阅读下列材料,回答问题.
大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中.lacZ基因中如果没有插入外源基因,便可表达出β-半乳糖苷酶.当培养基中含有A物质时,A物质便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的A物质不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落.pUC118质粒还携带了氨苄青霉素抗性基因.如图5是利用lacZ基因筛选重组质粒示意图.
(5)用图5中的培养基中筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌,制备时除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外还应加入物质应包括
 
(多选) A.伊红美蓝试剂  B.琼脂  C.A物质  D.氨苄青霉素  E.四环素  F.噬菌体
(6)将上述处理后的大肠杆菌置于图5中培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,结果可能出现蓝色或者白色菌落,其中
 
色大肠杆菌菌落即为含重组质粒的目的菌.

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