Question

4．如图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题：

（1）根据图示可知，若用EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶切割，因此DNA片段可有3个限制酶切割位点，切割后共有2种6个切割末端．
（2）EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是黏性末端．
（3）如果EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段要导入受体细胞，一般需要质粒作载体．其应具备的特点有：能自我复制、至少有一个限制酶切割位点、含标记基因．
（4）E•coliDNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中X（填字母）部位的化学键．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定
限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．

解答 解：（1）由图可知，图中有三个切割位点，如图所示EcoRⅠ切割后形成的末端黏性末端，SmaⅠ切割后形成的末端是平末端，共2种切割末端，6个切割末端．
（2）EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是黏性末端．
（3）在将目的基因导入受体细胞时，一般用质粒作为运载体，作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．
（4）E•coliDNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中X部位的化学键，即磷酸二酯键．
故答案为：
（1）3    2    6               
（2）黏性
（3）质粒     能自我复制、至少有一个限制酶切割位点、含标记基因．
（4）X

点评 本题考查基因工程内容，要求学生识记基因工程的操作原理和步骤，理解运载体具备的条件和限制的切割过程．