甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

 步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2: 根据筛选要求制备选择培养基时要注意             和            。 加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿             。

 步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

 步骤4：根据                                              筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有                       的特点。

(2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）             

（3)酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的            酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________ ，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行??           ，上述过程中通过控制               和               来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取              技术。

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：根据筛选要求制备选择培养基时要注意               和              。加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿           。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

步骤4：根据                        筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有           的特点。

（2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）                                       。

（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的            酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行           ，上述过程中通过控制         和        来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取              技术。

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。
（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2: 根据筛选要求制备选择培养基时要注意            和            。 加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿            。
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。
步骤4：根据                                             筛选出突变菌。
由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有                      的特点。
(2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）             
                                                                      
（3)酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的           酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________ ，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行­          ，上述过程中通过控制              和              来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取             技术。

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：根据筛选要求制备选择培养基时要注意     和   。加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿          。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

步骤4：根据         筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有      的特点。

（2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）         。

（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的    酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行       ，上述过程中通过控制     和     来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取     技术。

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

 步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2: 根据筛选要求制备选择培养基时要注意             和            。 加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿             。

 步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

 步骤4：根据                                              筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有                       的特点。

(2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）             

（3)酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的            酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________ ，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行­           ，上述过程中通过控制               和               来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取              技术。

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2: 根据筛选要求制备选择培养基时要注意             和            。 加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿             。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

步骤4：根据                                              筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有                       的特点。

（2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）

（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的            酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为__________，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行­           ，上述过程中通过控制               和               来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取              技术。

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：根据筛选要求制备选择培养基时要注意          和           。加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿           。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

步骤4：根据                        筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有           的特点。

（2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）                   。

（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的            酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行           ，上述过程中通过控制         和        来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取              技术。

39.【生物选修1：生物技术实践】（15分）

甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：根据筛选要求制备选择培养基时要注意____________和____________。加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿____________。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。

步骤4：根据____________筛选出突变菌。

由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有____________的特点。

（2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）____________。

（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的____________酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行____________，上述过程中通过控制____________和____________来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取____________技术。

为了实现燃料供应来源多样化，发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴

油、沼气等已经列入我国未来10年的发展计划。

广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的C₄植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。

请根据上述材料，回答下列问题：

(1)简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程：       。

(2)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后，通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：将野生菌液培养一段时间后，通过接受紫外线照射进行诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意    和    ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。

步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。

步骤4：根据        筛选出突变菌。

(3)上述步骤2、3和4的依据分别是     。

(4)利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵还有哪些可行方法?(列举两种)                  。

(5)甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是其     。请提出解决该问题的方法。(列举两种方法)     。

(6)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么?                        。