题目内容
甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，符合低能耗、低污染、低排放为基础的低碳经济模式。
（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗-榨汁（蔗糖）-酵母发酵—蒸馏-成品（燃料酒精）-蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：根据筛选要求制备选择培养基时要注意 和 。加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿 。
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释，涂布在固定培养基的表面。
步骤4：根据 筛选出突变菌。
由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有 的特点。
（2）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种） 。
（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的 酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为___________，如果要生产这种酶，那么就将所培养的该种微生物进行工业化发酵，然后将其产生的这种酶进行 ，上述过程中通过控制 和 来保持酶的活力。为了使酶回收和再利用，可以采取 技术。
（1）添加高浓度蔗糖（葡萄糖）（2分） 调低pH（2分） 倒置
是否能在选择培养基上生长 耐高糖和耐酸的特性
（2）①利用突变菌的耐酸特性，降低培养基的pH，达到抑菌的目的
②在培养基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，达到抑菌目的
（3）纤维素 纤维素 分离纯化 温度 pH 固定化
【解析】（1）根据题意分析，酒精发酵的理想菌种具有耐高糖和耐酸特性，则筛选该菌种的选择培养基需要添加高浓度蔗糖、调低pH。固体培养基的平板冷却凝固后还需要倒置，防止培养皿内壁上出现的冷凝水污染培养基。提供高糖和酸性的筛选环境，获得单菌落能生长，代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性。
（2）防止杂菌污染的方法：①利用突变菌的耐酸特性，降低培养基的pH值，达到抑菌的目的；②利用突变菌的耐高糖特性，通过高渗环境达到抑菌目的；③保持厌氧环境，达到抑菌目的；④在培养基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，达到抑菌目的。
（3）蔗渣的主要成分是纤维素，酵母菌缺乏纤维素酶，则不能分解蔗渣。如选择培养基中仅以纤维素作为碳源，可分离出具有纤维素酶的微生物。微生物可以产生多种酶，可根据蛋白质的不同特性的差异，经过分离纯化，获得纤维素酶。固定化酶的优点：使得酶既能与反应物接触，又能与产物分离；同时还可被反复利用。
考点：本题“甘蔗”为素材，综合考查培养基、无菌技术、纤维素酶、蛋白质的分离、酶的固定化等相关知识，意在考查考生的识记能力、分析能力和理解应用能力。
为了实现燃料供应来源多样化，如今，发展长期替代化石燃料的产品，如燃料酒精、生物柴油、沼气等的计划已经被列入我国未来10年的发展规划之中。
广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的植物(C4植物)，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。
请根据上述材料，回答下列问题：
(1)若要用甘蔗外植体为材料进行甘蔗大规模快速繁殖，请在下表中填出操作步骤第三步的名称。
| 第一步 | 第二步 | 第三步 | 第四步 | 第五步 | 第六步 | |
| 主要操作步骤 | 配置培养基 | 外植体消毒 | 培养 | 移栽 | 栽培 |
(2)若上述过程是在中学生物组培实验室里进行的，则第三步需要使用酒精(包括酒精灯)。酒精(及酒精灯)在此的两个主要用途是：_____________________、______________________。(各2分)
(3)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后，通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：将野生菌液体培养一段时间后，接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在配置基本培养基的基础上，还要额外添加________________，并将pH值________，然后添加琼脂，在进行灭菌处理后，制成固体平板。
步骤3：将经过紫外线照射后的菌液稀释，并涂布平板划线。
步骤4：筛选突变菌：挑选____________________菌落，即为耐高糖、耐酸特性的酵母菌。
(4)当第四步结束后，获得了大量幼苗。在此过程中，外植体通过脱分化产生________，然后通过调整植物激素比例，进行__________，形成具有芽和根的幼苗。
(5)甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是它们__________________。请提出解决该问题的方法。(列举两种生物分解方法)_____________________、____________________。(各2分)
(6)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入DNA聚合酶的作用是：从引物的3′'端开始催化__________________。
(7)PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同，分别是：_____________________和________________________。