3、(6分)目前基因工程所用的k*s#5^u质粒载体主要是以天然细菌质粒的k*s#5^u各种元件为基础的k*s#5^u重新组建的k*s#5^u人工质粒，pBR32质粒是较早构建的k*s#5^u质粒载体，主要结构如图所示。EcoRⅠ的k*s#5^u识别序列和切割位点是-G↓AATTC-，BamHⅠ的k*s#5^u识别序列和切割位点是-G↓GATCC-。

(1)构建基因表达载体时，和目的k*s#5^u基因拼接的k*s#5^u运载体需含有__________________和_____________________。

(2)和pBR32质粒拼接的k*s#5^u目的k*s#5^u基因的k*s#5^u两端应含有____________________(限制酶)的k*s#5^u识别序列和切割位点，构成的k*s#5^u重组质粒应保留____________________抗性基因。

(3)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的k*s#5^u大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的k*s#5^u培养基上培养，得到如图二的k*s#5^u菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的k*s#5^u培养基上培养，得到如图三的k*s#5^u结果(空圈表示与图二对照无菌落的k*s#5^u位置)。与图三空圈相对应的k*s#5^u图二中的k*s#5^u菌落表现型是(2分)________________________________________。

2、(10分)下表是一种培养基的k*s#5^u配方，请回答：

(1)此培养基的k*s#5^u营养要素除了水、无机盐外，还有__________________等。

(2)此培养基属于___________(固体/液体)培养基，主要用于__________________。

(3)无菌操作是微生物培养最基本的k*s#5^u要求，不同仪器或物品所使用的k*s#5^u灭菌方法是不同的k*s#5^u，对于培养基使用________________________，接种环使用_____________________。

(4)如果上述培养基用于植物的k*s#5^u组织培养，在培养基中还要添加___________________(激素名称)；两种重要激素，而且在使用这两种激素时，还要注意它们的k*s#5^u___________、_____________和使用的k*s#5^u先后顺序等。

(5)如果是单克隆抗体的k*s#5^u制备，则培养基中通常含有氨基酸、无机盐、维生素等，与植物组织培养有所不同的k*s#5^u是还含有____________和________________。

1、(10分)新华网报道，美国研究人员2009年8月24日宣布，他们利用人体皮肤细胞培育诱导多功能干细胞(iPS)，并成功分化出了不同类型的k*s#5^u视网膜细胞。这意味着将来视网膜受损的k*s#5^u患者可以利用自身皮肤细胞进行修复。请回答：

(1)iPS细胞具有全能性的k*s#5^u根本原因是____________________________________。iPS细胞能分化出不同类型的k*s#5^u视网膜细胞的k*s#5^u实质是___________________________________。

(2)根据iPS细胞的k*s#5^u这种功能特性，当我们身体的k*s#5^u某一类细胞功能出现异常或退化时，利用iPS细胞的k*s#5^u治疗思路是____________________________________________________。

(3)在培养胚胎干细胞时，需向培养液中加入95%的k*s#5^u空气和5%的k*s#5^uCO2的k*s#5^u混合气体，其中CO2的k*s#5^u作用是维持培养液的k*s#5^u_________________________________。

(4)将胚胎移入代孕小鼠体内属于_________________技术，在畜牧生产中采用这种技术的k*s#5^u优势主要是_____________________________________________。移植后的k*s#5^u胚胎能在受体子宫中存活的k*s#5^u生理基础是(2分)____________________________________________。

(5)在对囊胚时期胚胎进行分割时应注意(2分)_________________________________。

50、愈伤组织进行分化并产生出植物的k*s#5^u各种组织和器官，进而发育成完整的k*s#5^u植株，通常需要合适的k*s#5^u①光照　　　　　 ②温度　　　 ③营养物质　　　 ④激素

A、①②③④　 B、②③④　 C、①③④　 D、①②④

49、动物细胞进行传代培养不可能发生的k*s#5^u变化有

A、细胞形态发生变化　　　　　　　 B、细胞核核型发生变化

C、细胞不断增多，堆叠在一起　　　 D、细胞核体积减小

48、科学家为了研究抑制基因表达的k*s#5^u机制，在基因启动子后插入一段颠倒的k*s#5^u转录区序列(如图所示)，导致新基因转录形成的k*s#5^umRNA 因分子内部形成互补区而失去功能。该操作

A、需要限制性内切酶和DNA连接酶ks.5u

B、在细胞外实现了人工基因突变

C、干扰了基因表达中的k*s#5^u翻译过程

D、转录形成的k*s#5^umRNA分子内部靠A－T、C－G配对形成互补区

47、胚胎干细胞研究在医学上有重大应用价值。通过移植胚胎干细胞期望可以治疗下列哪一组疾病?　 ①糖尿病　 ②高血压　 ③唐氏综合征(21三体综合征)

④老年痴呆症　　 　　　 ⑤白化病　　　　 ⑥肝衰竭

A、①②⑤　　 B、②③⑥　　 C、①④⑥　　 D、③④⑤

46、将接种后的k*s#5^u培养基和一个未接种的k*s#5^u培养基都放入37℃恒温箱的k*s#5^u目的k*s#5^u是

A、对比观察培养基有没有被微生物利用　　　　 B、对比分析培养基上是否生有杂菌

C、没必要放入未接种的k*s#5^u培养基　　　　　　　　　　　 D、为了下次接种时再使用

45、通过选择培养基可以从混杂的k*s#5^u微生物群体中分离出所需的k*s#5^u微牛物。在缺乏氮源的k*s#5^u培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法不能从混杂的k*s#5^u微生物群体中分别分离出

A、大肠杆菌　　 B、霉菌　　 C、放线菌　　 D、固氮细菌

44、美国农业部指导农民在种植转基因农作物时，要求农民在转基因农作物的k*s#5^u行间种植一些普通的k*s#5^u非转基因农作物，供害虫取食，这种做法的k*s#5^u主要目的k*s#5^u是：

A、保护物种多样性　　　　　　　　　　　　 B、保护害虫的k*s#5^u天敌

C、减缓害虫抗性基因频率增加的k*s#5^u速率　　　　 D、维持农田生态系统中的k*s#5^u能量流动