37.(8分)科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因 ，该基因能激发许多动植物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景，请回答以下相关问题。

(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是　　　　　

(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体是有两次筛选，第一次筛选的目的是　　　　

　　　　　　　　　 第二次筛选的目的是　　　　　　　　　　　

(3)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答

① 对已导入重组的质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是：　　　　　　　　　　　　　　 ； 　

②题目中的Ⅱ所指的细胞是　　　 ，Ⅲ所指的细胞具有特点是　　　　　　　　　　　

(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程

福建省“华安、连城、永安、漳平一中、龙海二中、泉港一中”六校联考

2009-2010学年下学期第一次月考

36.(10分)回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面　　　　　 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的　　　　　 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是　　　　　 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是　　　　　 。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现　 　　　　　的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而获得　　　　　 ，该种细胞的黏着性　　　　　 ，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量　　　　　 。

(3)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂　　　　　　　　 期的细胞用显微镜进行观察。

(4)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作　　　　　 进行攻击。

35.(8 分)为扩大可耕地面积，增加粮食产量、黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA 分子所用的限制性内切酶作用于图中的　　　 处，DNA 连接酶作用于　　　 处。(填“a”或“b ”)

(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和　　　　　　 法。

(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用　　　　　　 　技术，该技术的核心是　　　　　　 　和　　　　　　

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的　　　　　

作探针进行分子杂交检测，又要用　　　　　　 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

34.(10分)“白菜-甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长周期短，耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜-甘蓝”培育过程示意图，请完成下列有关问题：

(1)由杂种细胞D培育成“白菜-甘蓝”植株，采用的技术手段是　　　　　　 。该过程说明植物细胞具有　　　　　　　　 。

(2)要制备“白菜-甘蓝”的人工种子，要在e步骤选取具有生根发芽能力的

　　　　　　 (结构)，包裹上人造种皮制得。

(3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是　　　　 ，融合依据的原理是

　　　　　　 。

(4)某二倍体植物基因型DdTt，利用这种生物技术采用花药离体培养的方法，可培育成“花粉胚”，也可制成人工种子，这种种子萌发形成的个体称为　　　　 　, 基因型有　　　　　　　　　　　 　.

(5)d表示脱分化的过程，其实质是　　　　　　　　 。e表示的过程　　　　　　 ，其实质是　　　　　　　　　　　　　　　 　

32．(10分)已知SARS是有一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作，其简要的操作流程如下：

(1)实验步骤①所代表的反应过程是　　　　　　

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和　　　　 酶，后者的作用是将用限制性内切酶切割的　　　　　　　 　和　　　　　　 连接起来。

(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因S蛋白基因在大肠杆菌中不能　　　　 也不能　　　　 。

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用　　　　　 与　　　　　　 进行抗原一抗体特异性反应实验，从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列　　　 (填相同或不同)，根本原因是　 　　　　　　　　　　。

33(10分)．现在，转基因技术广泛运用于生物新品种的培育，科研中多采用显微注射法，借助电子显微镜将外源基因注射到细胞中。但这一传统方法更多地适应于哺乳动物，而运用到家禽转基因时，成功率仅有5%到10%。有的专家尝试使用病毒侵染的方法开展转基因实验，但因为安全性问题，运用范围有限。多年来，国内外家禽转基因技术一直没有实现重大突破。据生命科学网报道：2007年9月，扬州大学动物科学院博士生导师李碧春教授率领的攻关小组经过4年的努力，成功研究出精原干细胞介导法，这一方法可广泛运用于家禽的转基因，而且成功率提高了10倍。

请回答下列问题：

(1)培育转基因动物的受体细胞是　　　　 　，是否转基因动物的每一个体细胞都含有目的基因？为什么？　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

(2)在基因工程中需要哪些酶？　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

被转移的基因在相应动物细胞中表达要经过　　　　　 和　　　　 两个过程。

(3)由上述材料可知，对家禽进行转基因育种，导入目的基因的理想方法是　　　　　　 ;如用病毒侵染的方法，存在的安全性问题主要是　　　　　　　　 　

(4)转基因动物依据的原理与克隆动物不同，克隆动物培育依据　　　　　　 原理。

(5)转基因动物与克隆动物相比较明显的优点是 ：　　　　　　　　　　　　　　　

31．(14分)有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：

(1)若a、b分别表示基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简单的筛选方法是　　　　　　　　　 。

(2)若a．、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是　　　　 ，这种育种方法的优点是　　　　　　　　　 。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和浆细胞，则d细胞特点是　　　　 。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有　　　　　　　　　 　的特点。生产上一般不能通过直接培养浆细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是　　　　　　　　　　　　　 。

(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程一般的顺序连接起来。顺序是 ：　 　　　　　　　　　

30．在现代生物工程技术中，下列研究方案可能 实现其目的是(　　 )

第II卷(非选择题　 共70分)

29．某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是(　　 )

A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理

B．细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是刺激细胞呼吸

C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素

D．在相同适宜条件下培养等量的甲、乙细胞，一段时间后，甲细胞数量比乙少

28．植物体细胞杂交的目的中错误的是 (　 )

A．把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上　 B．获得杂种植株

C．克服远源杂交不亲和的障碍　　　　　　　　 D．实现原生质体的融合

27．下列用动物细胞工程技术获取单克隆抗体的实验步骤中，不正确的是(　 )

A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞

B．用纤维素酶处理B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞

C．用灭活的仙台病毒作诱导剂，促使B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体